INT-2 gene amplification in differentiated human thyroid cancer

Summary

Oncogene amplification is frequent in many epithelial tumors and often associated with advanced tumor progression. In different epithelial neoplasias it helps to provide prognostic information on individual patients. The present study was performed to evaluate the hitherto unknown prevalence of INT-2 gene amplification and its potential usefullness as prognostic marker in patients with human thyroid cancer. We used differential quantitative polymerase chain reaction and fluorescent DNA technique as a reliable method to detect low copy-number amplification of oncogenes from archival carcinoma specimens. Sequences from the int-2 gene and the single copy gamma-interferon gene were amplified simultaneously by PCR and quantified on a fluorescence activated sequencer. Native tumor tissue from 63 patients with differentiated thyroid cancer (43 papillary, 3 oncocytary, and 17 follicular) and from 12 goiters was analyzed by differential quantitative polymerase chain reaction. The study group contained many far advanced tumors. 40% of tumors were recurrent, 35% were staged T4 tumors and 70% presented with lymphnode metastases. The prevalence of INT-2 amplification was 12% for follicular and 7% for papillary carcinomas. In goiter tissue no amplification was found. Amplification was only 2–4fold in positive cases. Low grade amplification is of no apparent importance in differentiated thyroid cancer.

Zusammenfassung

Die Amplifikation von Onkogenen findet sich bei epithelialen Tumoren häufig und ist hier oft mit dem Auftreten fortgeschrittener Tumore assoziiert. Bei verschiedenen Carcinomen läßt das Auftreten solcher Amplifikationen Rückschlüsse auf die Prognose einzelner Patienten zu. Die vorliegende Arbeit hatte zum Ziel, die bisher beim differenzierten Schildddrüsenkarzinom nicht bekannte Prävalenz der Amplifikation des Gens INT2 zu ermitteln und ihre mögliche Nützlichkeit als Prognosemarker solcher Patienten festzustellen. Wir verwendeten die differentielle quantitative Polymerasekettenre-aktion als verläßliche Methode zum Aufspüren niedrig-dosierter Amplifikationen in archivierten Karzinomproben. Sequenzen des Zielgens INT2 sowie des Einzelkopie-Gens gamma-In-terferon wurden simultan amplifiziert und die Amplifikations-produkte im fluoreszenz-aktivierten Sequenator quantifiziert. Nativgewebe von 63 Patienten mit differenzierten Schilddrüsenkarzinomen (davon 43 papilläre, 3 onkozytäre und 17 follikuläre Tumoren) sowie von 12 Patienten mit benigner Strumabildung wurden untersucht. Die Studiengruppe enthielt viele weit fortgeschrittenen Karzinome: 40% der Tumoren waren Rezidive, 35% T4 Tumore, 70% wiesen lymphonoduläre Metastasen auf. Die Prävalenz der INT2 Amplifikation lag bei 12% für follikuläre und 7% für papilläre Karzinome, während Strumagewebe die Mutation nicht aufwies. Die Genkopienzahl betrug bei den positiven Fällen nur 4–8. Zusammenfassend ist eine niedrig-dosierte INT2 Amplifikation auch beim fortgeschrittenen differenzierten Schilddrüsen-Karzinom selten.

Key words

INT-2 - FGF-3 - gene amplification - differentiated thyroid cancer