Direkte und indirekte Parameter für das freie Thyroxin

Im Rahmen eines umfangreichen Simultanvergleichs wird die klinische Brauchbarkeit der direkten radioimmunologischen Bestimmung des FT₄ mit dem ImmoPhase-, GammaCoat-, Liquisol-, Amerlexund LisoPhase-Assay im Vergleich zum FT₄-Index und zum T₄/TBG-Quotienten geprüft. Teil I der Publikation behandelt methodische Gesichtspunkte zur Qualitätskontrolle sowie in-vitro Experimente zur Probenbehandlung und zu Medikamenteneinflüssen. Die Reprodu zierbarkeit der radioimmunologischen FT₄-Bestimmung kann als zufriedenstellend betrachtet werden; die InterassayVariationskoeffizienten liegen im mittleren Konzentrationsbereich allgemein unter 10%. Durch eine nicht deklarierte Änderung der Standard-Kalibrierung ist allerdings die Interassay-Variabilität des Liquisol-Kits mit 17% unzureichend hoch. Der Vergleich der Meßbereiche ergibt, daß die Sensitivität der FT₄-Assays ausreichend ist. Die oberen Bereichs grenzen des Liquisolund des LisoPhase-Kits sind allerdings zu niedrig angesetzt. Bei Aufbewahrung der Proben als Serum ergeben sich für alle geprüften direkten und indirekten FTVParameter niedrigere Werte als bei Lagerung als Vollblut; dies gilt sowohl bei Kühlschrankals auch bei Raumtemperatur. Demgegenüber stimmen die Werte der indirekten FTVParameter für Vollblut und Serum insbesondere bei Kühlschrankaufbewahrung etwas besser überein. Wiederholtes Auftauen und Wiedereinfrieren von Proben beeinflussen die Ergebnisse der geprüften FT₄-RIAs nur unwesentlich. Die in-vitro Prüfung von Medikamenten-Einflüssen durch Zugabe therapeutisch üblicher Dosen von Primidon, Phénobarbital, Phenytoin und Azetylsalizylsäure zu den Proben ergibt nur für das letztgenannte Pharmakon eindeutige Effekte. Während beim Liquisolund LisoPhase-Assay die FT₄-Spiegel erwartungsgemäß in Abhängigkeit von der Azetylsalizylsäure-Dosis ansteigen, fallen sie beim Amerlexund GammaCoat-Kit ab. Bezüglich der Testhand habung weisen alle geprüften FT₄-RIAs keine besonderen technischen Probleme auf.

The clinical applicability of direct FT₄ determinations by the radioimmunoassays ImmoPhase, GammaCoat, Liquisol, Amerlex and LisoPhase is tested in comparison to the FT₄ index and the T₄/TBG ratio. Part I of this study deals with technical aspects concerning quality control as well as with in-vitro experiments concerning storage of samples and interference of drugs. The precision of FT₄-RIAs is satisfactory; inter-assay coefficients of variation are generally lower than 10% for medium hormone concentrations. Because of a change of the standard curve calibration by the manufac turer of the Liquisol kit, the inter-assay variability (17%) of this assay is unacceptably high. The comparison of working ranges shows that the sensitivity of all FT₄ assays is sufficient. However, the upper limits of working ranges of the Liquisol and LisoPhase kits are too low. Storing the samples in form of serum yields lower values for any FT₄ parameter than storing as whole blood. This unexpected observation is true for room temperature as well as for refrigeration at 4°C. To be sure, the values of indirect FT, parameters from serum and whole blood coincide somewhat better especially when the samples are stored in the refrigerator. Repeated thawing and refreezing does not influence the results of FT₄RIAs significantly. In vitro testing of drug interferences by addition of therapeutic doses of primidone, phénobarbital, phenytoin and acetylsalicylic acid yields significant effects only for the last quoted pharmaceutical. While the FT₄ levels of the Liquisol and LisoPhase assays rise with the acetylsalicylic acid dose according to expectations, the values of the Amerlex and GammaCoat assays decrease. With regard to handling of the tests, there are no special technical problems for all FT₄-RIAs tested.

• Literatur

• 1 Ashkar F. S., Buchler R. J., Chan T., Hourani M. Radioimmunoassay of free thyroxine with preboand anti-T₄- microcapsules. J. nucl. Med. 20: 956-960 1979;
• 2 Beyer H. K. Freies Thyroxin im Serum Vergleich and Bewertung verschiedener Bestimmungsmethoden. NUCComp. 12: 88-94 1981;
• 3 Böttger I., Dirr W., Pabst H. W. Clinical value of FT₄ RIA im comparison to T₄/TBG ratio in thyroid routine work-up. In: Nuclear Medicine and Biology. Raynaud C.. 1132 Pergamon-Press; Oxford: 1982.
• 4 Braverman L. E., Abreau C. M., Brock P., Kleinmann R., Fournier L., Odstrchel G., Schoemaker H. J.P. Measurement of serum free thyroxine by RIA in various clinical states. J. nucl. Med. 21: 233-239 1980;
• 5 Emrich D., Leipert K-P., Schreivogel I., Facorro U., Köbberling J. Qualitätskontrolle and Normbereiche für 10 Schilddrüsen-in-vitro-Parameter. Akt. endokr. 1: 245-253 1980;
• 6 Halpern E. P.h., Bordens R. W. Microencapsulated antibodies in RIA. II. Determination of free thyroxine. Clin. Chem. 25: 1561-1563 1979;
• 7 Hoff H. G., Reinwein D. Vorteile der direkten Bestimmung der freien T₄-Konzentration im Serum bei gestörter Schilddrüsen-Funktion. NUC-Comp. 12: 168-172 1981;
• 8 Klingler W., Ball P., Knuppen R. Erste Erfahrungen mit einem neuen Radioimmunoassay zur Bestimmung des freien Thyroxins. NUC-Comp. 12: 50-52 1981;
• 9 Klingler W., Vierke G. Die Bestimmung des freien Thyroxins - Ein Vergleich von vier Methoden. NUC-Comp. 12: 271-275 1981;
• 10 Klingler W. Vergleichende Untersuchungen aller zur Zeit erhältlichen Methoden zur Bestimmung des freien Thyro xins. Nucl. Med. 21: 174-178 1982;
• 11 Klingler W., Vierke G. Die Bestimmung des freien Thyroxins - Untersuchung zweier weiterer Methoden. NUC-Comp. 13: 77-80 1982;
• 12 Köhn H. Direkte radioimmunologische Bestimmung des freien Thyroxins im Serum: Erste klinische Ergebnisse. NUC-Comp. 10: 243-247 1979;
• 13 Lin T., Hankin H. R. Direct measurement of free thy roxine in patients with T₃-toxicosis. Horm. Metab. Res. 12: 611-614 1980;
• 14 Mahlstedt J. Ein neues Testprinzip zur Messung des freien Thyroxins (FT₄) im Serum - Ergebnisse einer Multicenter studie. NUC-Comp. 12: 56-60 1981;
• 15 Midgley J. E.M., Wilkins T. A., Giles A. F., Whitworth A. S. Free-T₄ levels in patients receiving anticonvul sants, salicylate and phenylbutazon therapy. Acta endocrinol. (Kbh.). Suppl 243. 1981 Abstr. 178
• 16 Reiners Chr., Hoffmann R., Moll E., Baum K., Becker W., Eilies Chr., Gerhards W., Schick F., Spiegel W., Wiede mann W., Börner W. Direkte and indirekte Parameter für das freie Thyroxin. II. Diagnostische Treffsicherheit bei Schilddrüsenfunktionsstörungen and Transportprotein-Ano malien Nucl. Med. 22: 273-287 1983;
• 17 Romelli P. B., Pennisi F., Vancheri L. Measurement of free thyroid hormones in serum by column adsorption chro matography and radioimmunoassay. J. endocrinol. Invest. 2: 25-40 1979;
• 18 Rootwelt Κ. The influence of fatty acids on serum thyroxine determination by competitive protein binding radioassay. Scand. J. clin. Lab. Invest. 35: 649-652 1975;
• 19 Szpunar W. E., Block M., Bednarz M. N., Stoffer Sh. S. Clinical evaluation of three free thyroxine assays. J. nucl. Med. 21: 576-578 1980;
• 20 Walter H. Direkte and indirekte Parameter für das freie Trijodthyronin and Thyroxin. Inaugural Dissertation Würz burg (in Vorber.).
• 21 Weidmann H-W. Prüfung einer enzymatischen Methode zur Thyroxinbestimmung. Inaugural-Dissertation.. 1980. Würzburg:
• 22 Wenzel K. W. Einfluß von pharmakologischen Substanzen auf die In-vitro-Tests der Schilddrüsenfunktionsdiagnostik: Anlaß zu diagnostischen Irrtümern. Therapiewoche. 1980; 30: 43-53.
• 23 Witherspoon L. R., St. Shuler E., Garcia M. M., Zollinger L. A. An assessment of methods for the estimation of free thyroxine. J. nucl. Med. 1980; 21: 529-539.