Nitrergische Reaktivität in den Endothelzellen der menschlichen uvealen Gefäße

Zusammenfassung

Hintergrund Wir untersuchten das Vorkommen von Nikotinamid-Adenin-Dinukleotid-Phosphat (NADPH)-Diaphorase-Aktivität in menschlichen Endothelzellen der Choroidea. Das histochemische NADPH-Diaphorase-Verfahren erlaubte die Lokalisation der potentiellen Produktionsorte von Stickstoffmonoxid in den Endothelzellen.

Material und Methoden 11 Spenderbulbi für Hornhauttransplantation, 6 Männer, 5 Frauen, Alter 56±8 Jahre, postmortale Präparationszeit 14±7h (1 h-26 h), standen zur Verfügung. Nach Ausstanzung der Corneoskleralpräparate wurden Flachpräparate der Choroidea hergestellt. Das retinale Pigmentepithel wurde mit einem Jockeymesser abgekratzt. Gefrierschnitte (12-16 µm) von Ziliarkörper und Iris wurden angefertigt. Anschließend wurden alle Gewebe mit dem NADPH-Diaphorase-Verfahren behandelt. Die auf Chromalaun-Gelatine-beschichtete Objektträger aufgezogenen Präparate wurden in Kaisers Glyceringelatine eingedeckt und unter dem Lichtmikroskop betrachtet.

Beobachtungen Die lichtmikroskopische Untersuchung der menschlichen uvealen Gefäße ergab eine NADPH-Diaphorase-Reaktivität. Diese erschien als blaue punktförmige Strukturen im Zytoplasma der Endothelzellen, die die Wand der uvealen Gefäße bilden. Die Verteilung der NADPH-Diaphorase-Reaktionsprodukte zeigte keine signifikanten Unterschiede zwischen den Endothelzellen von großen und kleinen Gefäßen in Choroidea, Ziliarkörper und Iris. Ganglienzellen in der Choroidea und im Ziliarkörper zeigten ebenfalls NADPH-Diaphorase-Reaktivität.

Schlußfolgerung Die NADPH-Diaphorase-Aktivität der uvealen Endothelzellen, zusammen mit den nitrergischen Ganglienzellen der Choroidea, könnte eine Rolle bei der Stickstoffmonoxid-abhängigen Erweiterung der uvealen Gefäße spielen.

Summary

Background We investigated-the presence of Nicotinamid-adenin-dinucleotidphosphat (NADPH)-diaphorase activity in endothelial cells of the human uveal vessels, using a histochemical procedure which presumably localizes the reaction product nitric oxide.

Material and methods 11 donor eyes destined for corneal transplantation (male: 6; female: 5; age: 56±8 years) were used within 14±7 h postmorten. After removal of the cornea and retinal pigment epithelium, flat mounts of the choroid were made. Serial sections, 12-16 µm in thickness were cut from the ciliary body and iris using a cryomicrotome. Sections mounted on chromalaun-gelatine-coated glass slides, treated according the standard NADPH-diaphorase reaction and finally mounted in Kayser's glycerol-gelatine prior to examination in the light microscope.

Results Human choroidal vascular endothelial cells revealed positive NADPH-diaphorase activity, which was detected by the presence of punctate blue staining in the cytoplasm. No significant difference in distribution pattern or area density was seen amongst small and large vessels in either choroid, ciliary body or iris. Ganglion cells in the choroid and ciliary body also exhibited NADPH-diaphorase reactivity.

Conclusion The presence of NADPH-diaphorase reactivity in vascular endothelial and ganglion cells of the human choroid suggests a possible nitrergic relaxation mechanism in human uveal vasculature.

Schlüsselwörter

Endothelzellen - Uvea - NADPH-Diaphorase - Stickstoffmonoxid - Histochemie - Interzellulärer Botenstoff - Ganglienzellen

Key words

Endothelial cells - NADPH-diaphorase - uvea - nitric oxid - human - histochemistry - intercellular messenger - ganglion cells