Hintergund: Der Prozess der Aktivierung pankreatischer Stellate-Zellen (PSZ) nimmt eine Schlüsselstellung
bei der Pathogenese der Pankreasfibrose ein und stellt ein geeignetes Target für die
Entwicklung antifibrotischer Therapiestrategien dar. Ziel: Am Modell isolierter PSZ der Ratte sollte die Rolle des Activin A (ACT)-Follistatin
(FST) – Systems im Verlauf der Aktivierung der PSZ analysiert werden. Methodik: Die Aktivierung der PSZ erfolgte mittels in vitro-Kultivierung nach Isolation der Zellen aus dem Pankreas von Lewis-Ratten. Als Aktivierungsmarker
wurde α-smooth muscle actin (SMA) verwendet. Die Messung der Zellproliferation erfolgte
mit Hilfe des BrdU-Einbaus in die DNA, zur Bestimmung der Collagensynthese diente
der Einbau von 3H-Prolin. Die RNA-Expression wurde mit der RT-PCR analysiert. Die
Immunoblot-Technik verwendeten wir zum Nachweis von Proteinen sowie von intrazellulären
Signalwegen. Ergebnisse: Im Verlauf der PSZ-Aktivierung war die Expression von ACT und FST gegenläufig: Die
Transcript-Spiegel von ACT stiegen nach dem 4. Tag in Kultur parallel zur SMA-Expression
deutlich an, im Gegensatz dazu wurde FST herabreguliert. Der Effekt von rekombinantem
ACT war vom Aktivierungsstadium abhängig: Ruhende PSZ waren resistent gegenüber ACT.
Dagegen induzierte ACT am 5. Tag nach Zellisolation drastisch die SMA-Expression.
Während ACT die Collagensynthese von PSZ erhöhte, war kein signifikanter Einfluss
auf die Zellproliferation nachweisbar. Die Smad2-Aktivierung korrelierte mit dem ACT-Spiegel.
Die Expression von Smad7 und ACT verhielten sich umgekehrt proportional. Alle ACT-vermittelten
Effekte konnten durch FST aufgehoben werden. Außerdem führte die Behandlung der PSZ
mit FST zu einer Reduktion der SMA-Expression. Schlussfolgerungen: Die differenzielle Expression von ACT und FST in PSZ weist auf komplexe auto- bzw.
parakrine Regulationsmechanismen der funktionellen Antagonisten hin. Die zeitliche
Verzögerung von Expressionsänderungen und Reaktivität während der PSZ-Aktivierung
könnte unter in vivo-Bedingungen eine Schutzfunktion darstellen, die eine PSZ-Aktivierung bei leichter
Pankreasschädigung verhindert. Gefördert durch das BMBF (FKZ 01ZZ0108)
Keywords: Fibrose, Pankreatische Stellate-Zellen
