Effekte von cis-Hydroxyprolin auf pankreatische Stellate – Zellen

Einleitung: Bei der Pankresfibrose stellen die pankreatischen Stellate-Zellen (PSZ) die wesentlichen Effektorzellen dar und sind somit wichtige Targetstrukturen für neue antifibrotische Therapiestrategien. Das Prolinanalogon cis–4-Hydroxy-L-Prolin (CHP) hemmt kompetitiv die Kollagensynthese.

Zielsetzung: Der Einfluss von CHP auf pankreatische Stellate-Zellen sollte untersucht werden.

Methodik: Zwei in unserem Labor etablierte immortalisierte PSZ–Zelllinien wurden für die Untersuchungen eingesetzt. Die Messung der Zellproliferation erfolgte mit der Bromdesoxyuridin (BrdU) – Methode und dem Celltiter – Test. Der Nachweis der Zellapoptose wurde mit Hilfe der Sub-G1-Peak – Methode flowzytometrisch geführt. Der Effekt von CHP auf Proteine des intrazellulären Signaltransfers wurde mit Western-Blotting untersucht.

Ergebnisse: CHP führte zu einer reversiblen Ablösung der in vitro adhärent wachsenden PSZ und hemmte dosisabhängig die Zellproliferation. Eine Apoptoseinduktion war gleichfalls nachweisbar. CHP bewirkte eine proteolytische Spaltung der focal adhesion kinase (FAK). An diesen Prozessen ist eine Aktivierung der Caspase 3 beteiligt.

Schlussfolgerungen: CHP führte in vitro zu einer Wachstumshemmung von PSZ. Vermittelt wird der CHP-Effekt über eine FAK – Inaktivierung durch Proteolyse. Als Folge der Enzyminaktivierung kommt es zu einer Hemmung der Zelladhäsion verbunden mit der Induktion der Apoptose. CHP soll im Tiermodell der chronischen Pankreatitis hinsichtlich seiner antifibrotischen Wirksamkeit untersucht werden.

Gefördert durch das BMBF (FKZ 01ZZ0108)