Eine mikroangiographische Technik zur Quantifizierung fasziokutaner Blutgefäße am kleinen Versuchstier

Zusammenfassung

Ziel: Es wird eine mikroangiographische Technik beschrieben, welche eine Darstellung kleiner Blutgefäße mit einem Durchmesser von ∼ 20 µm und die Quantifizierung fasziokutaner Blutgefäße mittels einer digitalen Computeranalyse bei sehr kleinen Versuchstieren erlaubt. Methode: Die linke Arteria carotis von 45 nu/nu-Mäusen wurde mit einem Venenverweilkatheter kanüliert (26 Gauge) und eine Mischung aus Gelatine, Bariumsulfat und grüner Tinte nach einem standardisierten Protokoll injiziert. Durch digitale Mammographie wurden die fasziokutanen Blutgefäße dargestellt und mittels eines Computerprogrammes bezüglich der Länge des Gefäßnetzes und dessen Fläche (pixel) analysiert. Ergebnisse: Mit der beschriebenen mikroangiographischen Methode lassen sich fasziokutane Blutgefäße deutlich darstellen. Zielgebiete (Regions of Interest: ROI) können definiert, das vaskuläre Netzwerk kann quantifiziert werden. Identische ROIs zeigen eine hohe Reproduzierbarkeit bezüglich der gemessenen Einheiten (pixel) < 6,5 ± 2,4 %. Durch den Gebrauch von digitaler Bildverarbeitung stellte sich der Prozess der Quantifizierung zuverlässig, reproduzierbar und schnell dar. Schlussfolgerung: Durch die Kombination von mikrochirurgischen Techniken, pharmazeutischem Wissen und modernen computergestützten Bildverarbeitungssystemen waren wir in der Lage, Blutgefäße bis zu einem Durchmesser von ∼ 20 µm in kleinen Versuchstieren darzustellen und zu quantifizieren.

Abstract

Purpose: A microangiographic technique is described, which allows visualization of small blood vessels with a diameter of ∼ 20 µm and quantification of fasciocutaneous blood vessels by means of digital computer analysis in very small laboratory animals. Method: The left carotid artery of 45 nu/nu mice was cannulated (26 gauge) and a mixture of gelatine, barium sulfate and green ink was injected according to standardized protocol. Fasciocutaneous blood vessels were visualized by digital mammography and analyzed for vessel length and vessel surface area as standardized units (pixel) by computer program. Results: With the described microangiography method fasciocutaneous blood vessels can be clearly visualized. Regions of interest (ROIs) can be defined and the containing vascular network quantified. Identical ROIs showed a high reproducibility for measured unit (pixel) < 6.5 ± 2.4 %. By the use of digital image, processing the quantification of vessels was reliable, reproducible and fast. Conclusion: Combining microsurgical techniques, pharmacological knowledge and modern computer imaging analysis systems, we were able to visualize and quantify blood vessels with a diameter of ∼ 20 µm even in small laboratory animals.

Schlüsselwörter

Versuchstier - Angiogenese - Angiographie - Datenanalyse

Key words

Laboratory animals - angiogenesis - angiography - data analysis

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