SIMULTANEOUS SPECTROMETRIC DETERMINATION OF 5–ENE AND 7–ENE STEROLS FROM THE LEAVES AND SEEDS OF DIGITALIS PURPUREA L.

Abstract

A method is described for the simultaneous spectrophotometric determination of the 5–ene and the 7–ene sterols in extracts from the leaves and seeds of Digitalis purpurea L. The method is based on the observation that, when the sterols are mixed with the Liebermann–Burchard reagent, 7–ene sterols develop a colour more rapidly than the 5–ene sterols. A non–polar lipid fraction and a polar glycoside fraction were isolated from both the seeds and the leaves. In each fraction the 5–ene sterols were calculated with reference to 24α–ethylcholest–5–en–3β–ol (β–sitosterol), and the 7–ene type with reference to 24β–methylcholesta–5–7–22–trien–3β–ol (ergosterol). The mean error in the determination of the former was 2.7 % and for the latter was 4.5 %. By means of GLC the 5–ene sterols of the non–polar fraction were found to be cholesterol, an unknown sterol, campesterol, stigmasterol and β–sitosterol; and of the polar fraction, campesterol, cholesterol, stigmasterol and β–sitosterol.

Zusammenfassung

Es wird ein Methode zur gleichzeitigen spektrophotometrischen Bestimmung der 5–en und 7–en Sterole im Extrakt aus Blättern und .Samen von Digitalis purpurea beschrieben. Sie beruht auf der Beobachtung, daß bei Mischung mit Liebermann–Burchard–Reagenz die 7–en–Sterole schneller eine Farbreaktion geben als die 5–en–Sterole. Aus Samen und Blättern wurden eine apolare Lipidfraktion und eine polare Glykosidfraktion isoliert. In beiden Fraktionen wurden die 5–en–Sterole bestimmt mit 24α–Äthylcholest–5–en–3β–ol (= β–Sitosterol als Bezugssubstanz) und die 7–en–Sterole mit 24β–Methylcholesta–5–7–22–trien–3β–ol (= Ergosterol). Der Analysenfehler betrug 2,7 % für die 5–en–Sterole bezw. 4,5 % für die 7–en–Sterole. Durch GLC wurden in der apolaren und polaren Fraktion die 5–en–Sterole Cholesterol, Campesterol, Stigmasterol und β–Sitosterol gedungen, in der apolaren Fraktion dazu noch ein unbekanntes Sterol.