Palabras Clave
desorden del desarrollo sexual - gen SRY - hipogonadismo - citogenética - desarrollo
sexual - cariotipo
Keywords
disorder of sexual development - SRY gene - hypogonadism - cytogenetics - sexual development
- karyotype
Introducción
Los Desórdenes de la Diferenciación Sexual (DSD, por sus siglas en inglés) son condiciones
poco frecuentes en las que no existe concordancia entre el sexo cromosómico o genético
y el sexo fenotípico de un individuo. Los varones XX, (DSD 46, XX) son un tipo de
DSD que se conoce también como síndrome La Chapelle, en referencia al autor que describió
esa entidad por primera vez en 1964.[1] Se estima que esa rara condición se presenta en uno de cada 20.000 nacimientos.[2] Esos pacientes frecuentemente presentan uno de estos tres fenotipos:
1) Fenotipo masculino, genitales externos masculinos, que son referidos fundamentalmente
por infertilidad o hipogonadismo.
2) Ambigüedad genital de grado variable detectada al nacimiento, dentro de las que
destacan micropene, hipertrofia del clítoris, hipospadias.
3) Hermafroditismo verdadero, con ambigüedad genital y ovotestes.[3]
[4]
[5]
El 80 al 90% de los varones con cariotipo convencional en sangre periférica 46, XX
son SRY positivos (+) y presentan un grado normal de virilización, mientras que el
10% restante son SRY negativos (-) con grados de virilización incompleta.[6]
El gen SRY está ubicado en el brazo corto del cromosoma Y, inmediatamente debajo de
la región pseudoautosómica. Este gen es el principal desencadenante de la diferenciación
al sexo masculino, pues inicia un conjunto de eventos en cascada que conducen a la
evolución de la cresta genital indiferenciada hacia el testículo.[7]
[8]
En la mayoría de los casos 46, XX SRY (+) se produce una translocación del gen SRY
al cromosoma X en virtud de un apareamiento meiótico desigual en la gametogénesis
paterna. En otros casos más raros, el gen SRY se transloca hacia un cromosoma autosómico.
Los varones 46, XX SRY (-) ponen en evidencia la necesaria participación de otros
genes en la diferenciación testicular.[8]
En este trabajo se presenta el comportamiento clínico, genético y bioquímico de dos
varones 46, XX con el objetivo de mostrar aspectos claves en el algoritmo diagnóstico
de esas condiciones, que si bien son de baja prevalencia, constituyen un reto para
el equipo médico tratante.
Materiales y Métodos
Las historias clínicas de ambos pacientes fueron revisadas con énfasis en obtener
la información referida a antecedentes pre, peri y postnatales, resultados de estudios
hormonales, ecográficos, de laboratorio y genéticos. Ambos pacientes recibieron evaluación
clínico-genética y se elaboró la genealogía familiar incluyendo tres generaciones
filiales. El consentimiento informado fue solicitado y firmado en ambos casos, siempre
protegiendo la identidad de cada paciente.
Se realizó cariotipo convencional mediante cultivo de linfocitos obtenidos por punción
de vena periférica, aplicando bandeo GTG y conteo de 20 metafases con resolución de
550 bandas.
Para el estudio molecular del cromosoma Y, se aplicó la técnica de la Reacción en
Cadena de la Polimerasa (PCR) utilizando el kit Y Chromosome AZF Analysis System (Promega Corporation, Madison, WI USA) mediante cinco reacciones multiplex separadas
(A, B, C, D y E) que permiten detectar la presencia o ausencia de 20 regiones específicas
del cromosoma Y como se detalla en la [Tabla 1]. La visualización de los fragmentos amplificados se realizó a través de electroforesis
horizontal en gel de agarosa grado analítico al 4% (p/v).
Tabla 1
Regiones cromosómicas incluidas en las reacciones múltiplex de la PCR
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Mix A
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LOCUS
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DAZ
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DYS240
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DYS271
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DYS221
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KAL-Y
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SMCX
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STS
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SY254
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SY157
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SY81
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SY130
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SY182
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Mix B
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LOCUS
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SMCY
|
DYS218
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DAZ
|
DAZ
|
SMCX
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STS
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SY2PR3
|
SY127
|
SY242
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SY208
|
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Mix C
|
LOCUS
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DYS219
|
DYS212
|
DYF51S1
|
DAZ
|
SMCX
|
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STS
|
SY128
|
SY121
|
SY145
|
SY255
|
|
|
|
Mix D
|
LOCUS
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DYS223
|
DYS236
|
DYS215
|
SMCX
|
|
|
|
STS
|
SY133
|
SY152
|
SY124
|
|
|
|
|
Mix E
|
LOCUS
|
ZFX/ZFY
|
SRY
|
DYS224
|
DYS148
|
DYS273
|
|
|
STS
|
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SY14
|
SY134
|
SY86
|
SY84
|
|
Caso 1
Paciente ecuatoriano de género masculino, 24 años de edad, acude al Servicio de Genética
Médica del Hospital de Especialidades Fuerzas Armadas No.1, Quito-Ecuador, referido
desde la Red Integral Pública de Salud por la especialidad de Endocrinología para
estudio de hipogonadismo.
El paciente no refiere antecedentes familiares relevantes y presenta historia de buena
salud personal. Mediante examen físico se constata una talla de 163 cm, peso de 69 kg,
brazada de 165 cm, IMC de 26, vello axilar y púbico normal, pene de tamaño normal,
testículos pequeños de 3,4 mL, no ginecomastia, voz varonil, no anosmia o hiposmia.
Los resultados del perfil hormonal, estudio ecográfico y espermograma se resumen en
la [Tabla 2].
Tabla 2
Datos clínicos del Caso 1
|
Parámetros
|
Caso 1
|
|
FSH (mUI/mL)
|
18
|
|
LH (mUI/mL
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26.9
|
|
17 OH progesterona
|
No se ha realizado
|
|
Testosterona total (ng/dL)
|
299
|
|
Tipo de hipogonadismo
|
Hipergonadotrópico
|
|
Espermograma
|
Azoospermia
|
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Biopsia testicular
|
No se ha realizado
|
|
Ecografía testicular
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Atrofia testicular bilateral
|
En el estudio genético, el cariotipo evidenció la presencia de dos cromosomas X y
ausencia del cromosoma Y ([Fig. 1]), mientras que el análisis molecular reveló la presencia del gen SRY con ausencia
de las otras regiones específicas del cromosoma Y ([Fig. 2]).
Fig. 1 Cariotipo de Caso 1 con técnica de bandeo GTG, 46, XX.
Fig. 2 Gel de agarosa grado analítico 4% (p/v). Abreviaciones: CM, control masculino; CN,
control negativo; L, marcador de peso molecular de 50 bp; P, paciente caso.
Caso 2
Paciente ecuatoriano de género masculino, 11 años de edad, acude al Servicio de Genética
Médica del Hospital de Especialidades Fuerzas Armadas No.1, Quito-Ecuador, referido
desde la Red Integral Pública de Salud por la especialidad de Endocrinología Pediátrica
para estudio de escrotos vacíos.
En su historia personal resalta haber nacido con criptorquidia bilateral congénita
para lo cual le realizaron orquidopexia a los cinco años de edad. Además, el paciente
no refiere antecedentes familiares relevantes.
Mediante examen físico se constató talla de 113 cm (baja talla por debajo del 3er
Percentil), peso de 26 kg, brazada de 108 cm, IMC de 20,33, cuello corto, teletelia,
tórax ancho y longitud del pene de 5 cm. También, el paciente presenta bolsas escrotales
vacías y se palpa hacia la región supra púbica una tumoración blanda que parece corresponder
al testículo derecho.
Los resultados del perfil hormonal, estudios ecográficos, anatomopatológicos y estudios
genéticos se resumen en la [Tabla 3].
Tabla 3
Datos clínicos del Caso 2
|
Parámetros
|
Caso 2
|
|
FSH (mUI/mL)
|
8
|
|
LH (mUI/mL
|
16
|
|
17 OH progesterona
|
Normal
|
|
Testosterona total (ng/dL)
|
32
|
|
Tipo de hipogonadismo
|
Hipergonadotrópico
|
|
Ecografía testicular
|
- en pliegue labioescrotal: teste izquierdo 0'78 × 0'58 × 0'3 con volumen 0,08 mL
- teste derecho en anillo inguinal profundo, 0'78 × 0'58 × 0'3 con volumen 0,07 mL
- se identifica próstata y vesículas seminales
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Biopsia testicular
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Tejido testicular conservado de gónada derecha e izquierda
|
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Espermograma
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No realizado por edad del paciente
|
En el estudio genético, el cariotipo evidenció la presencia de dos cromosomas X y
ausencia del cromosoma Y ([Fig. 3]). El análisis molecular demostró la ausencia de 20 sitios específicos de la región
AZF (Factor de azoospermia) del cromosoma Y incluyendo el gen SRY ([Fig. 4]).
Fig. 3 Cariotipo de Caso 2 con técnica de bandeo GTG, 46, XX.
Fig. 4 Gel de agarosa grado analítico 4% (p/v). Abreviaciones: CF, control femenino; CM,
control masculino; CN: control negativo; L, marcador de peso molecular de 50 bp; P,
paciente caso 2.
Discusión
Los casos presentados muestran dos espectros clínicos diferentes de los DSD 46, XX,
tanto desde el punto de vista genético con presencia y/o ausencia del gen SRY así
como desde el punto de vista fenotípico con virilización completa versus virilización
incompleta.
En el caso 1, la sospecha diagnóstica inicial fue Síndrome de Klinefelter por el tamaño
reducido de los testes asociado a un hipogonadismo hipergonadotrópico que es la patología
más frecuente a descartar en esos casos. Sin embargo, una somatometría corporal sin
hábito eunucoide y una talla menor a la esperada para los casos 47, XXY pueden ser
indicios a considerar en el diagnóstico diferencial clínico, aspecto que fue evidenciado
y en el que coinciden varios autores.[9]
[10]
Los resultados de los estudios de biología molecular constataron la presencia del
gen SRY en el caso 1. En una amplia revisión de la literatura de los últimos años
sobre la base de una investigación de fertilidad masculina, Majzoub y col., (2017)
describe una serie significativa de varones 46, XX en los que se detectó mediante
FISH la presencia del gen SRY en el 83,7% de los casos (n = 49).[11] La presencia del gen SRY se reconoce como el principal factor determinante en la
virilización.[8] Sin embargo, otros genes de la región AZF juegan también un rol determinante en
la espermatogénesis y podrían ser los responsables de la azoospermia que se constató
en este paciente donde esa región estuvo totalmente ausente.[12]
El genotipo observado en el caso 1, sugiere una translocación del gen SRY a otro cromosoma
que no fue posible definir con exactitud al no realizar el estudio FISH. La ubicación
cromosómica de esa translocación no se consideró imprescindible para este caso tomando
en cuenta el resultado del estudio molecular realizado. Obsérvese que todas las regiones
del cromosoma Y exploradas, que incluyeron 19 regiones comprendidas en la región AZF,
estuvieron ausentes. Este resultado indica una selectividad del gen SRY en la presunta
translocación causal.
La edad al diagnóstico coincide con la reportada en la literatura que se estima entre
24 a 34 años[13] y el fenotipo presentado ha sido reportado en otras series publicadas donde el aspecto
masculino normal, la talla promedio de 1,66 cm ± 6, la azoospermia y el hipogonadismo
hipergonadotropico han sido las características más relevantes.[11] Generalmente, para estos casos con virilización normal, la sospecha diagnóstica
se establece en la adultez temprana a consecuencia de infertilidad. Es curioso que,
en nuestro paciente, la infertilidad no resultara en el motivo inicial para los estudios
sino la constatación de unos testes muy pequeños, en el contexto de un examen médico
para ingresar a una Institución Armada.
Debe considerarse que la ausencia de genes del cromosoma Y que se reconocen implicados
en el crecimiento puberal y el efecto de la testosterona en la talla final de un individuo,
son factores que podrían explicar la baja talla observada en nuestro caso y que suelen
caracterizar a varones 46, XX SRY (-).[9]
En contraste, el caso 2 presentó ausencia del gen SRY, situación que se describe en
alrededor del 10% de pacientes varones 46, XX.[6]
[10] Su detección a la edad de 11 años, facilitó el acompañamiento médico y psicológico
precoz. Llama la atención la historia de orquidopexia referida a los 5 años de edad,
situación ya antes reportada en otros casos en los que la presencia de criptorquidia
bilateral congénita sin descenso antes de los dos años de edad, habría llevado a cirugías
correctoras.[14]
Esos reportes ilustran que la realización de estudios citogenéticos previos a decisiones
quirúrgicas, si bien no es imprescindible en todas las criptorquidias, debería considerarse
de primera línea en pacientes nacidos a término con criptorquidia bilateral persistente
y más aún si se asocia a baja talla.
La hipótesis de un posible mosaicismo bajo de línea Y que sea capaz de explicar el
desarrollo testicular observado en el segundo caso es la menos probable, pues si bien
a nivel citogenético podría no ser detectado, los resultados moleculares son contundentes
ya que ninguno de los 20 sitios específicos de la región AZF del cromosoma Y amplificó
mediante la PCR. Por otro lado, la hipótesis de una posible mutación en un gen autosómico,
implicado en la cascada de la diferenciación testicular, queda entre abierta y refuerza
la necesidad de la complementación de este caso a través de estudios con paneles genéticos
de diferenciación sexual donde podrían destacar los defectos genéticos en los receptores
de las hormonas peptídicas, los miembros de la superfamilia de los receptores esteroideos
y otros factores de transcripción, así como cualquiera de una serie de enzimas y cofactores
que intervienen en la biosíntesis de los esteroides y que pueden inducir la determinación
sexual.[15] Otros autores han defendido la presencia de diferentes genes determinantes del sexo
localizados en células autosómicas que al parecer también inician el proceso de “masculinidad.”
Por ejemplo, se sabe que el gen SOX9, ubicado en el brazo largo del cromosoma 17,
potencia los efectos del gen SRY y su sobreexpresión se ha relacionado con 46, XX
varones SRY negativos.[16]
El manejo de ambos pacientes se centró en su inserción a un equipo multidisciplinario
integrado por endocrinólogos, urólogos, imagenólogos, genetistas y psicólogos. En
el primer caso, los pilares fundamentales del tratamiento fueron el suministro de
testosterona para evitar complicaciones médicas como la osteoporosis relacionada con
la deficiencia de esta hormona y el acompañamiento psicológico. En el segundo caso,
se realizó el despistaje mediante estudios imagenológicos de derivados mullerianos
internos y se posterga el suministro hormonal hasta la pubertad.
En ambos casos, la asesoría genética personal y familiar se basó en la ausencia de
consanguinidad y de antecedentes familiares positivos que orientan al posible carácter
esporádico de esas condiciones. Por otro lado, la imposibilidad reproductiva de ambos
pacientes minimiza el riesgo de trasmisión, dado que en el caso 1, la etiología de
la enfermedad es una posible translocación del gen SRY hacia un cromosoma X o cromosoma
autosómico y en el caso 2 una posible mutación génica de-novo implicada en los DSD.
En conclusión, los casos expuestos ilustran la dificultad de un reconocimiento precoz
de los DSD debido a que son eventos relativamente raros. Desde el punto de vista diagnóstico,
el criterio clínico debe apoyarse en técnicas citogenéticas, moleculares, bioquímicas
e imagenológicas, que permitan identificar los mecanismos causales de ese grupo heterogéneo
de condiciones clínicas. Su manejo adecuado se basa en un enfoque multidisciplinario
ya que constituyen un grupo complejo de condiciones, con implicaciones no solo clínicas
sino psicológicas y sociales, por lo que siguen siendo un reto para el médico contemporáneo.
