Mikroskopische Untersuchung des Korneaepithels auf der Grundlage des intrazellulären Umsatzes fluorogener Substrate

Zusammenfassung

Die derzeit zur Verfügung stehenden Methoden zur Darstellung des Korneaepithels mit Hilfe der Spaltlampe erlauben im wesentlichen die Detektion und Diagnose signifikanter Läsionen sowie pathologischer und degenerativer Prozesse der Epithelschicht. Es besteht jedoch ein stark zunehmender Bedarf an der frühen Erkennung von beginnenden Schädigungen der Epithelschicht anhand einfacher typischer Zellreaktionen. Als ein methodischer Ansatz für eine solche Epitheluntersuchung auf Zellebene kann die Fluoreszenzmikroskopie des intrazellulären Umsatzes fluorogener Substrate dienen. Orientierende experimentelle Untersuchungen mit isotonischer 10^-5 molarer Fluoreszein-diazetat-Lösung am Kaninchenauge unter Verwendung eines für die Fluoreszenzmikroskopie am Korneaepithel umgerüsteten Endothelmikroskops (Spiegelmikroskops) und eines Restlichtbildverstärkers zeigen, dass mit diesem Prinzip eine hervorragende mikroskopische Abbildung nicht nur der zellulären Epithelstruktur schlechthin, sondern auch lokal geschädigter Bezirke des Epithels unmittelbar nach Einwirkung insbesondere zellmembranschädigender Substanzen möglich ist.

Summary

The methods presently available for examination of the corneal epithelium by use of the ophthalmic slit lamp are more or less restricted to the detection and diagnosis of significant lesions and the morphological results of pathologic processes in the epithelial layer at relatively low magnification and optical resolution. There is an increasing demand, however, for early detection of initial damaging effects to the corneal epithelium by testing simple specific reactions at cell level. Fluorescein microscopy of the intracellular turnover of fluorogenic substrates may become a valuable methodological basis for such an examination of the corneal epithelium. Orienting experimental investigations into the uptake and turnover of fluorescein-di-acetate (FDA) by the epithelial cells of the rabbit cornea after its exposure to isotonic 10^-5 molar FDA solution, using an endothelial specular microscope and an image intensifier TV camera, demonstrate that this principle permits a superior microscopic presentation not only of the cellular epithelial structure in general, but also of locally damaged areas of the epithelium immediately after their exposure to damaging chemical agents, in particular to substances affecting cell membranes.