Aufbau der Kindertumorzellbank der Gesellschaft für Pädiatrische Onkologie und Hämatologie (GPOH)

Abstract

Characterized cell lines are absolutely necessary in applied research of cell biology and medicine. For the completion of diagnosis and therapy especially in pediatric oncology we are establishing a Cell Bank for Pediatric Tumors.

The Cell Bank for Pediatric Tumors collects tissue samples of different types of solid malignant tumors from children and young adults. The specimens are transfered to in vitro culture (guidelines of the American Type Culture Collection - ATCC), the resulting cells are characterized to assure accordance with the histogenesis of the original tumor and stored in liquid nitrogen. The cell cultures are characterized morphologically (phase contrast mircro-scopy) and immunocytochemically (ABC-method). To prove the malignancy of cells in primary culture the amount of hypertretraploid cells was determined (DNA-Scanning-Cytophotometry). Cell lines are checked to find out whether they develop tumors in nude mice followed by an analysis of the karyotype. Additional investigations (e.g. in vitro test of cytostatic drug resistance) are carried out on request by the sender.

Part of the tumor tissue which is used to start the cell culture is in parallel diagnosed histopathologically at the Children's Tumor Register, Kiel and/or at the Charité.

By the end of the year 1995 the Cell Bank for Pediatric Tumors had received 183 different specimens including 123 solid tumors (e.g. 24 neuroblastomas, 18 osteosarcomas, 12 Wilms' tumors, 13 rhabdomyosarcomas), 44 tissue specimens without any malignant cells, 8 probes without vital cells and 8 leukemias and lymphomas.

We were able to establish primary cell cultures of 50% of the sterile tumor tissue probes, to cultivate them for a minimum of 5-10 passages, to characterize and freeze them. Six out of these tumor cell lines were already cultivated for one year and are available to the scientific community.

Zusammenfassung

Kultivierte und charakterisierte Zellinien sind in der Forschung ein unumgängliches Handwerkszeug geworden. Zur Ergänzung der diagnostischen und therapeutischen Möglichkeiten in der Paido-Onkologie wird gegenwärtig eine Kindertumorzellbank (KTZB) aufgebaut.

Die KTZB sammelt Gewebeproben solider maligner Tumoren aller Entitäten von Patienten im Kindes- und Jugendalter. Hiervon wird eine in vitro Kultur der Tumorzellen angelegt (Richtlinien der American Type Culture Collection - ATCC), entsprechend der Histogenese des Ursprungstumors charakterisiert und asserviert. Die Charakterisierung der Zellkulturen erfolgt morphologisch und immunzytochemisch (ABC-Methode). Zum Nachweis der Malignität wird der Gehalt an hypertetraploiden Zellen in der primären Kultur bestimmt (DNA-Scanning-Zytophotometrie). Für permanente Zellinien wird eine Karyotypanalyse durchgeführt und ihre Tumorigenität in der Nacktmaus überprüft. Zusatzuntersuchungen (z.B. in vitro Chemosresistenztestung) werden nach Absprache mit dem behandelnden Arzt durchgeführt.

Parallel zur Zellkultivierung wird das als Ausgangsmaterial dienende Tumorgewebe am Kindertumorregister, Kiel und/oder an der Charité pathomorphologisch diagnostiziert und dokumentiert.

Die KTZB erhielt bis Ende 1995 insgesamt 183 Einsendungen unterschiedlichster Gewebeproben. Dazu gehörten 123 solide Tumoren (24 Neuroblastome, 18 Osteosarkome, 12 Wilms' Tumoren, 13 Rhabdomyosarkome u.a. in geringerer Anzahl), 44 Gewebeproben ohne maligne Zellen, 8 Proben ohne vitale Zellen sowie 8 Leukämien und Lymphome.

50% der sterilen Gewebeproben konnten primär angezüchtet, mindestens über 5-10 Passagen kultiviert, charakterisiert und kryokonserviert werden. Aus diesem Bestand wurden bereits 6 Tumorzellinien permanent über ein Jahr kultiviert und stehen der ,,Scientific Community'' zur Verfügung.

Key words

Pediatric tumors - in vitro culture - cell bank - tumor cell lines

Schlüsselwörter

Kindertumoren - in vitro Kultur - Zellbank - Tumorzellinien