Vergleich zweier Antibiotika-Kombinationen bei der Kultivierung von humanen Nasalepithel-Sphäroiden von Probanden mit Mukoviszidose

Durch Bürstenabstrich gewonnenes nasales Epithel lagert sich in der Zellkultur zu Sphäroiden zusammen, die aufgrund der schlagenden Zilien auf ihrer Oberfläche um die eigene Achse rotieren. Die Sphäroidkultur von Probanden mit Mukoviszidose gestaltete sich aufgrund bakterieller Kontamination als schwierig. Wir wollten untersuchen, ob durch eine optimierte Antibiotika-Kombination das Resultat der Zellkultur verbessert werden kann.

Nasalepithel von 8 Probanden mit Mukoviszidose wurde für 2–5 Tage mit zwei Antibiotika-Kombinationen kultiviert: 1. Penicillin und Streptomycin (10 U/ml Penicillin, 10µg Streptomycin/ml) vs. 2. Ceftazidine, Vancomycin und Tobramycin (C/V/T) (100µg/ml C, 100µg/ml V, 80µg/ml T). Zusätzlich wurde Anphotericin B (1µg/ml) für beide Gruppen verwendet. Die Kontamination und Bildung von Sphäroiden wurde jeweils beurteilt. Am letzten Kulturtag wurde die Rotationsfrequenz der Sphäroide bei 37°C vor und nach Stimulation mit ATP gemessen, daraus und dem Durchmesser der Sphäroide wurde die mukoziliäre Transportgeschwindigkeit (v _Sp) errechnet.

Kontamination bei Penicillin/Streptomycin 100%, bei C/V/T 0%

		Sphäroide
		ja	nein	Gesamt
Antibiotika	Penicillin/Streptomycin	1	14	15
	Ceftadizine/Gentamycin/Tobramycin	14	1	15
Gesamt		15	15	30

v _Sp basal=4,41mm/min; v _Sp nach Stimulation mit ATP=4,66mm/min (Mittelwerte), (p<0,001, Varianzanalyse mit Generalized Estimating Equation Ansatz).

Ceftazidine/Vancomycin/Tobramycin ist eine gut geeignete Antibiotika-Kombination für die Kultur von Nasalepithel-Sphäroiden bei Probanden mit Mukoviszidose. Die Rotationsfrequenz der Sphäroide und die errechnete mukoziliäre Transportgeschwindigkeit an deren Oberfläche befanden sich in derselben Größenordnung wie bei gesunden Probanden.