TNF-a und IL-6 spielen als pro-inflammatorische Zytokine eine wichtige Rolle in der
Pathogenese der Pankreatitis. Der p38/MK2-Signaltransduktionsweg ist maßgeblich an
der Regulation der Zytokin- und Genexpression beteiligt. In früheren Untersuchungen
konnten wir zeigen, dass die Hemmung dieses Signalweges das Ausmaß der akuten Pankreatitis
in einem MK-2 (-/-) Mausmodell signifikant vermindert. Die MK-2 knockout Mäuse zeigten
signifikant niedrigere Serumspiegel für TNF-a und IL-6. Um die zugrunde liegenden
Mechanismen näher zu identifizieren, untersuchten wir jetzt isolierte Azini von MK-2
(-/-) Mäusen im Vergleich zu Wildtyp Azini. Die Azini wurden durch Kollagenaseverdau
isoliert und mit CCK in supramax. Konzentration für 30–60 Minuten stimuliert. Neben
der Bestimmung der Amylase erfolgte die Messung der Trypsinaktivierung in isolierten
Azini sowie die Bestimmung der TNF-a und IL-6-Spiegel mittels ELISA im Überstand und
in Azinushomogenaten. Die mRNA-Spiegel aus isolierten Azini für TNF-a und IL-6 wurden
mittels quant. PCR bestimmt. Schließlich wurden mittels spezifischer Antikörper für
Caspase 3, 8, 9 sowie STAT1 und 3 und Cytochrom C im Western Blot Apoptose-regulierende
und transkriptionelle Signalwege untersucht. Untersuchungen der Amylasesekretion nach
Stimulation mit CCK ergaben keine signifikanten Unterschiede zwischen Wildtyp und
MK-2 -/- Azini. Für IL-6 fanden sich in MK-2 -/- Azini nach CCK-Stimulation sowohl
auf Protein- als auch auf mRNA-Ebene deutlich verminderte Expressionsmuster während
für TNF-a dies nur auf der Proteinebene zutraf. Interessanterweise zeigten MK-2 -/-
Azini nach CCK-Stimulation im Vergleich zu Wildtyp Azini eine signifikant verminderte
Trypsinaktivierung. Die Ergebnisse der Western Blot Untersuchungen ergaben weder für
Caspase 3, 8, 9 und Cytochrom C noch für STAT1 und STAT3 signifikante Unterschiede
zu Wildtyp Azini nach CCK Stimulation. Zusammenfassend lässt sich festhalten, dass
die Gendeletion von MK-2 protektiv im Modell der Caerulein-induzierten Pankreatitis
wirkt. Ursache hierfür scheint eine verminderte Expression und Sekretion von IL-6
und TNF-a in den Pankreasazini zu sein. Die IL-6-Expression wird hierbei transkriptionell
reguliert während für TNF-a a.e. post-transkriptionelle Mechanismen verantwortlich
sind.
