Der Transkriptionsfaktor NFAT2 ist im Pankreaskarzinom ektopisch aktiviert und führt zu Hyperproliferation durch Überexpression des c-Myc-Onkogens

Einleitung: Die NFAT-Proteine sind eine Familie Calzium-responsiver Transkriptionsfaktoren, für die vor allem zentrale Rollen in der T-Lymphozyten-Aktivierung und der Herzklappen-Entwicklung beschrieben sind. Wir zeigen hier, dass mit NFAT2 ein Mitglied dieser Transkriptionsfaktor-Familie ektopisch in Pankreaskarzinomzellen exprimiert wird und entscheidend zur Karzinogenese im Pankreas beiträgt. Material und Methoden: NFAT2-, Calcineurin- und c-Myc-Expression wurde mittels quantitativer RealTime PCR (qRT-PCR) und Western Blot-Analysen überprüft. NFAT2-Aktivität wurde anhand von Reportergen-Assays, DNA-Bindungs-Studien und subzellulärer Lokalisations-Analyse ermittelt. Endogene NFAT2-Aktivität in kultivierten Pankreaskarzinomzellen wurde durch Ionomycin-Behandlung stimuliert bzw. durch Cyclosporin A-(CsA)-Behandlung oder siRNA-vermittelten ‘knock-down’ der NFAT2 mRNA inhibiert. Daraus resultierende zellbiologische Veränderungen wurden mit Hilfe von Proliferations-Assays und Durchfluss-Zytometrie analysiert. Ergebnisse und Schlussfolgerungen: NFAT2 ist im Pankreaskarzinom ektopisch exprimiert und transkriptionell aktiv. Inhibition der NFAT2-Aktivität durch siRNA-vermittelten ‘knock-down’ der NFAT2-Expression oder Inhibition des klassischen Ca²⁺/Calcineurin-Signalwegs durch CsA-Behandlung in vitro resultiert in signifikant verminderten Zellproliferationsraten als Folge einer anteilsmäßigen Verschiebung von Zellen aus der S-Phase zur G1-Phase. Dieser Effekt wird hauptsächlich durch den Einfluss von NFAT2 auf die c-Myc-Expression vermittelt. Aktiviertes NFAT2 bindet an ein spezifisches Element innerhalb des proximalen c-Myc-Promotors und verstärkt die c-Myc-Transkription, die in der Folge zu einem beschleunigten G1/S-Phasen-Übergang führt. Wir konnten somit zeigen, dass die ektopische Expression von NFAT2 in Kombination mit aberranter Aktivierung des Ca²⁺/Calcineurin-Signalwegs in Pankreaskarzinomzellen einen wichtigen neuen Mechanismus der onkogenen c-Myc-Aktivierung in Pankreaskarzinomzellen, in denen keine genomische Amplifikation des c-Myc-Gens vorliegt, darstellt.