Expression von NOD2/CARD15 und RIP2 in bronchialen Epithelzellen (BEAS-2B)

Einleitung: NOD2 ist ein intrazellulärer Rezeptor des angeborenen Immunsystems, dessen Expression bisher hauptsächlich in monozytären Zellen und Darmepithelien gezeigt wurde. SNPs im NOD2 Gen konnten mit M. Crohn und intestinaler Graft-versus-Host Disease (GvHD) sowie Lungenversagen nach allogener Stammzelltransplantation assoziiert werden.

Methoden: Die Expression von NOD2 sowie des in der Aktivierungskaskade relevanten Adapterproteins RIP2 wurde mittels Real-time Polymerase Kettenreaktion (PCR) und Western Blot zeitabhängig unter verschiedenen inflammatorischen Stimulationsbedingungen in der bronchialen Epithelzelllinie BEAS-2B untersucht.

Ergebnisse: In BEAS-2B Zellen fand sich eine geringe basale mRNA Expression von NOD2 (0,0082% bezogen auf β-Aktin), die nach Stimulierung mit Tumor TNFα 10 ng/ml maximal auf das 211±79–fache^§ (p<0,05) und insbesondere in Kombination mit Interferon γ (IFNγ) 100 IU/ml hochsignifikant maximal auf das 750±75–fache^§ hochreguliert wurde (p<0,001), während IFNγ allein und Lipopolysaccharid (LPS) 1µg/ml eher modulatorisch auf die Expression einwirkten.

Die basale RIP2 mRNA Expression betrug 0,824% bezogen auf β-Aktin. TNFα- und LPS-Gabe führten zu einer geringen aber signifikanten, IFNγ-Gabe zu einer starken Hochregulation bis zu 10,5±1,92–fache^§ (p<0,05). Die ausgeprägteste Hochregulation wurde nach Kostimulierung mit TNFα und IFNγ gefunden. Hier zeigte sich eine maximale Expressionsteigerung auf das 43±13–fache^§ (p<0,001).

^§Mittelwert±Standardabweichung

Schlussfolgerung: NOD2 und RIP2 werden im Bronchialepithel exprimiert und werden nach Stimulierung mit TH₁-Zytokinen und LPS hochreguliert. Eine Bedeutung für Entzündungsvorgänge am Bronchialepithel ist wahrscheinlich. Krankheitsspezifische Unterschiede sollten analysiert werden.