Erhöhte intrahepatische Expression von HLA-E und erhöhte Anzahl NKG2A-positiver NK Zellen bei der chronischen Hepatitis C Infektion

Hintergrund: Die Infektion mit dem Hepatitis C Virus führt häufig zu einer chronischen Erkrankung. In diesem Zusammenhang wurde eine Dysfunktion von Natürlichen Killer(NK)-Zellen als mögliche Ursache diskutiert. Ein wichtiger Regulatur der NK Zell-Funktion ist das nicht-klassische MHC Klasse I Moleküle HLA-E, welches über den inhibierenden NK-Zell-Rezeptoren CD94/NKG2A erkannt wird. In der vorliegenden Arbeit untersuchten wir die intrahepatische HLA-E Expression sowie die Expression von NKG2A auf NK Zellen bei der chronischen Hepatitis C.

Material und Methoden: Die Expression von NKG2A wurde durchflusszytometrisch auf NK Zellen von 27 HCV RNA-positiven und 9 gesunden Kontrollen gemessen. Weiterhin erfolgte die Bestimmung der NKG2A-Expression auf NK Zellpopulationen, die aus Leberproben von 3 HCV-Patienten isoliert worden waren. Die intrahepatische Expression von HLA-E erfolgte immunhistochemisch anhand des HLA-E spezifischen Antikörpers 3D12 an Leberproben von 5 HCV RNA(+) und 5 HCV RNA(-) Patienten. Anhand von Doppelfärbungen und durchflusszytometrischen Untersuchungen wurden die intrahepatischen HLA-E positiven Zelllpopulationen phänotypisch charakterisiert.

Ergebnisse: CD3(-)CD56(+) NK Zellen von HCV RNA(+) Patienten zeigten eine signifikant höhere NKG2A-Expression als NK Zellen von gesunden Kontrollen (MW±SEM: 52,3%±5,2% vs. 16,7%±3%; p<0,001). Die Analyse der intrahepatischen NK Zellen bestätigten dieses Ergebnisse. In Leberproben von HCV RNA(+) Patienten fand sich eine signifikant erhöhte Anzahl HLA-E exprimierender Zellen im Vergleich zu den Proben von HCV RNA(-) Personen (p<0,05). Es zeigte sich, dass es sich hierbei überwiegend um CD68(+) Makrophagen/Kupfferzellen handelte. Allerdings konnte eine HLA-E Expression auch auf CD14(+)Monozyten, Endothelzellen (CD31-positiv), CD83-positiven dendritischen Zellen und im geringeren Ausmass auf intrahepatischen CD14(+) Monozyten nachgewiesen werden. In Zytotoxizitätsassays konnte belegt werden, dass durch die erhöhte Expression von NKG2A auf NK Zellen in Kombination mit der gesteigerten HLA-E Expression die Lyse durch NK Zellen bei der Hepatitis C gehemmt wird.

Schlussfolgerung: Die gleichzeitig erhöhte Expression des inhibierenden NK Zell-Rezeptors NKG2A und seines Liganden HLA-E in der chronischen HCV-Infektion stellt somit einen neuen Mechanismus dar, durch den das Hepatitis C Virus der NK Zell-vermittelten Immunantwort entkommen kann.

Key words

HLA-E - Hepatitis C Virus - NK Zellen