Kutane Maligne Lymphome. Nutzen und Grenzen des Nachweises klonaler T-Zellen

Zusammenfassung

Ungeachtet der zunehmenden Kenntnisse über die kutanen malignen Lymphome bleibt die Abgrenzung der frühen Stadien der Mycosis fungoides (MF) von benignen, T-Zell-reichen Dermatosen problematisch. Um diese Differenzierung zu erleichtern, wurden molekulargenetische Techniken zum Nachweis klonaler T-Zellen eingeführt, deren Nutzen und Grenzen im Folgenden Artikel erörtert werden sollen. In Hautproben kutaner Lymphome gelingt der Nachweis eines dominanten T-Zell-Klons in etwa 80 %, dieser kann aber die Diagnose kutanes T-Zell-Lymphom nicht sichern, weil dominante T-Zell-Klone auch in bis zu 40 % bei benignen T-Zell-dominierten Dermatosen gefunden werden. Lediglich eine sichere Abgrenzung der Parapsoriasis en petites plaques von frühen MF-Stadien und eine valide Ausbreitungs- und Rezidivdiagnostik sind möglich. Die Anwendung der Technik an Blutproben zeigt, dass eine Dissemination der klonalen T-Zellen bereits in frühen Stadien kutaner Lymphome auftritt, aber unserer Ansicht nach ohne prognostische Relevanz bleibt. Hierbei handelt es sich höchstwahrscheinlich um eine (physiologische) Rezirkulation, und inwieweit die Quantität der zirkulierenden klonalen T-Zellen prognostisch relevant ist, bleibt vorerst unbekannt. Interessanterweise wird bei einem Sechstel der Blutproben von gesunden Personen eine klonale T-Zell-Expansion unbekannter Signifikanz (TEXUS) gefunden. TEXUS tritt auch bei Patienten mit kutanem Lymphom auf und muss bei der Analyse der T-Zell-Klonalität im peripheren Blut beachtet werden. Die molekulargenetischen Techniken sind aber auch wissenschaftlich interessant. So kann der Nachweis klonaler T-Zellen in Kombination mit Einzelzell-PCR- oder Hybridisierungs-Techniken auch zur Bestimmung des Klonalitätsstatus einzelner Zellen im Hautinfiltrat genutzt werden.

Abstract

Despite growing knowledge on cutaneous malignant lymphomas, the differentiation of early stages of Mycosis fungoides (MF) from benign T-cell rich dermatoses stays difficult. To facilitate this, molecular genetic techniques have been introduced to detect clonal T-cells. Pros and cons of these techniques will be discussed in this review. The detection of a dominant T-cell clone succeeds in about 80 % of skin specimens from cutaneous lymphomas. However, this does not ensure the diagnosis of cutaneous lymphoma since dominant T-cell clones have also been found in up to 40 % of samples from benign T-cell rich dermatoses. Only the differentiation of early MF from small plaque parapsoriasis and a valid staging are possible. Application of the technique in blood samples indicates a dissemination of the clonal T-cells already at early stages of cutaneous lymphomas. However, in our opinion this feature has no prognostic relevance but is the expression of the (physiological) recirculation. To what extent the quantity of circulating clonal T-cells correlates with the prognosis is so far not known. Interestingly, investigation of blood specimens from healthy controls reveals a clonal T-cell expansion of unknown significance (TEXUS) in one sixth of the cases. TEXUS is also observed in patients with cutaneous lymphoma and should be considered when assessing the T-cell clonality in blood samples. The molecular genetic techniques discussed here are also of scientific impact. The detection of clonal T-cells in combination with single cell PCR or hybridisation techniques can be used to determine the state of clonality of every single cell of a cutaneous infiltrate.

Literatur

• 1 Scheller U, Muche J M, Sterry W, Lukowsky A. Detection of clonal T cells in cutaneous T cell lymphoma by polymerase chain reaction: comparison of mutation detection enhancement-polyacrylamide gel electrophoresis, temperature gradient gel electrophoresis and fragment analysis of sequencing gels.  Electrophoresis. 1998;  19 653-658
• 2 Lukowsky A, Richter S, Dijkstal K, Sterry W, Muche J M. A T-cell receptor gamma polymerase chain reaction assay using capillary electrophoresis for the diagnosis of cutaneous T-cell lymphomas.  Diagn Mol Pathol. 2002;  11 59-66
• 3 Ahnhudt C, Muche J M, Dijkstal K, Sterry W, Lukowsky A. An approach to the sensitivity of temperature-gradient gel electrophoresis in the detection of clonally expanded T-cells in cutaneous T-cell lymphoma.  Electrophoresis. 2001;  22 33-38
• 4 Weiss L M, Hu E, Wood G S, Moulds C, Cleary M L, Warnke R, Sklar J. Clonal rearrangements of T-cell receptor genes in mycosis fungoides and dermatopathic lymphadenopathy.  N Engl J Med. 1985;  313 539-544
• 5 Trainor K J, Brisco M J, Wan J H, Neoh S, Grist S, Morley A A. Gene rearrangement in B- and T-lymphoproliferative disease detected by the polymerase chain reaction.  Blood. 1991;  78 192-196
• 6 Muche J M, Lukowsky A, Asadullah K, Gellrich S, Sterry W. Demonstration of frequent occurrence of clonal T cells in the peripheral blood of patients with primary cutaneous T-cell lymphoma.  Blood. 1997;  90 1636-1642
• 7 Schiller P I, Flaig M J, Puchta U, Kind P, Sander C A. Detection of clonal T cells in lichen planus.  Arch Dermatol Res. 2000;  292 568-569
• 8 Ashton-Key M, Diss T C, Du M Q, Kirkham N, Wotherspoon A, Isaacson P G. The value of the polymerase chain reaction in the diagnosis of cutaneous T-cell infiltrates.  Am J Surg Pathol. 1997;  21 743-747
• 9 Muche J M, Lukowsky A, Heim J, Friedrich M, Audring H, Sterry W. Demonstration of frequent occurrence of clonal T cells in the peripheral blood but not in the skin of patients with small plaque parapsoriasis.  Blood. 1999;  94 1409-1417
• 10 Bakels V, van Oostveen J W, Gordijn R L, Walboomers J M, Meijer C J, Willemze R. Frequency and prognostic significance of clonal T-cell receptor beta-gene rearrangements in the peripheral blood of patients with mycosis fungoides.  Arch Dermatol. 1992;  128 1602-1607
• 11 Muche J M, Sterry W, Gellrich S, Rzany B, Audring H, Lukowsky A. Peripheral blood T-cell clonality in mycosis fungoides and nonlymphoma controls.  Diagn Mol Pathol. 2003;  12 142-150
• 12 Fraser-Andrews E A, Woolford A J, Russell-Jones R, Seed P T, Whittaker S J. Detection of a peripheral blood T cell clone is an independent prognostic marker in mycosis fungoides.  J Invest Dermatol. 2000;  114 117-121
• 13 Beylot-Barry M, Sibaud V, Thiebaut R. et al . Evidence that an identical T cell clone in skin and peripheral blood lymphocytes is an independent prognostic factor in primary cutaneous T cell lymphomas.  J Invest Dermatol. 2001;  117 920-926
• 14 Delfau-Larue M H, Laroche L, Wechsler J. et al . Diagnostic value of dominant T-cell clones in peripheral blood in 363 patients presenting consecutively with a clinical suspicion of cutaneous lymphoma.  Blood. 2000;  96 2987-2992
• 15 Sandberg Y, Heule F, Lam K, Lugtenburg P J, Wolvers-Tettero I L, van Dongen J J, Langerak A W. Molecular immunoglobulin/T-cell receptor clonality analysis in cutaneous lymphoproliferations. Experience with the BIOMED-2 standardized polymerase chain reaction protocol.  Haematologica. 2003;  88 659-670
• 16 Muche J M, Karenko L, Gellrich S, Karhu R, Kytola S, Kahkonen M, Lukowsky A, Sterry W, Ranki A. Cellular coincidence of clonal T cell receptor rearrangements and complex clonal chromosomal aberrations - a hallmark of malignancy in cutaneous T cell lymphoma.  J Invest Dermatol. 2004;  122 574-578
• 17 Gellrich S, Wilks A, Lukowsky A, Wernicke M, Muller A, Muche JM, Fischer T, Jasch K C, Audring H, Sterry W. T cell receptor-gamma gene analysis of CD30+ large atypical individual cells in CD30+ large primary cutaneous T cell lymphomas.  J Invest Dermatol. 2003;  120 670-675
• 18 Gellrich S, Wernicke M, Wilks A, Lukowsky A, Muche J M, Jasch K C, Audring H, Mason D, Sterry W. The cell infiltrate in lymphomatoid papulosis comprises a mixture of polyclonal large atypical cells (CD30-positive) and smaller monoclonal T cells (CD30-negative).  J Invest Dermatol. 2004;  122 859-861
• 19 Muche J M, Sterry W. Vaccination therapy for cutaneous T-cell lymphoma.  Clin Exp Dermatol. 2002;  27 602-607
• 20 Willemze R, Kerl H, Sterry W. et al . EORTC Classification for primary cutaneous lymphomas: A proposal from the cutaneous lymphoma study group of the European organization for research and treatment of cancer.  Blood. 1997;  90 354
• 21 Grange F, Hedelin G, Joly P. et al . Prognostic factors in primary cutaneous lymphomas other than mycosis fungoides and the Sezary syndrome. The French Study Group on Cutaneous Lymphomas.  Blood. 1999;  93 3637
• 22 Harris N L, Jaffe E S, Diebold J. et al . The World Health Organization Classification of Neoplastic Diseases of the Hematopoietic and Lymphoid Tissues.  Ann Oncol. 1999;  10 1419
• 23 Muche J M. Molekulare Diagnostik kutaner Lymphome. 42. Tagung der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft, Berlin 2003. 
• 24 Dereure O, Levi E, Kadin M E. T-Cell clonality in pityriasis lichenoides et varioliformis acuta: a heteroduplex analysis of 20 cases.  Arch Dermatol. 2000;  136 1483-1486
• 25 Lukowsky A, Muche J M, Sterry W, Audring H. Detection of expanded T cell clones in skin biopsy samples of patients with lichen sclerosus et atrophicus by T cell receptor-gamma polymerase chain reaction assays.  J Invest Dermatol. 2000;  115 254-259
• 26 Haeffner A C, Smoller B R, Zepter K, Wood G S. Differentiation and clonality of lesional lymphocytes in small plaque parapsoriasis.  Arch Dermatol. 1995;  131 321
• 27 Theodorou I, Delfau-Larue M H, Bigorgne C, Lahet C, Cochet G, Bagot M, Wechsler J, Farcet J P. Cutaneous T-cell infiltrates: analysis of T-cell receptor gamma gene rearrangement by polymerase chain reaction and denaturing gradient gel electrophoresis.  Blood. 1995;  86 305-310