Vergleichende Untersuchung zum Nachweis von porzinem Circovirus 3 in neonatalem Hodengewebe mittels qPCR, RNAscope und konventioneller in-situ Hybridisierung (ISH)

Einleitung Die Relevanz von PCV3-Infektionen bei Hausschweinen ist derzeit nicht abschließend geklärt. Histologische Läsionen, die mit PCV3 assoziiert werden, sind unter anderem eine multisystemische lymphohistiozytäre Arteritis und Periarteritis. Die unklare Bedeutung regelmäßiger Nachweise hoher DNA-Gehalte in Hodensaftproben (processing fluids) von Saugferkeln bedarf einer genaueren pathologischen Betrachtung.

Material und Methoden Aus 13 Würfen eines Ferkelerzeugerbestandes standen 149 Hoden zu Verfügung. Pro Wurf wurden vier Hoden zufällig ausgewählt und zunächst gepoolt mittels qPCR auf PCV3-DNA untersucht. Positive Hodenpools mit CT-Werten <30 wurden aufgelöst, alle Hoden einzeln mittels PCR nachuntersucht und eine histologische Untersuchung inklusive konventioneller ISH und RNAscope durchgeführt. PCR negative Hodenproben (n=4) dienten als Negativkontrolle.

Befunde Bei 10/13 Poolproben ergab die qPCR ein PCV3-DNA positives Ergebnis, drei davon mit CT< 30. Folglich standen zwölf PCV3 positive und vier PCV3 negative Hoden für die histologischen Untersuchungen zu Verfügung. Bei keinem Hoden zeigte das neonatale Hodengewebe auffällige Veränderungen, insbesondere keine nennenswert vermehrten Entzündungszellinfiltrate. ISH und RNAscope zeigten positive Signale im Zytoplasma der Stromazellen des Samenstrangs sowie der Tunica vaginalis. Die RNAscope hatte im Vergleich zur qPCR eine Sensitivität von 43,7% und eine Spezifität von 100%. Einzelne positive Signale waren mittels RNAscope bis zu einem CT von 33, in der konventionellen ISH bis zu einem CT von 18,7 nachzuweisen.

Schlussfolgerungen Der Nachweis von PCV3-DNA war nicht mit entzündlichen Veränderungen im Hodengewebe assoziiert. Die RNAscope-Technologie empfiehlt sich als weiterführende Untersuchung qPCR hoch positiver Gewebe, nicht aber zum routinemäßigen Screening.

Publikationsverlauf

Artikel online veröffentlicht:
13. Juni 2025