Vollautomatisierter Prozess für die GMP-fähige Herstellung von neuen, über carbamoyliertes Arginin Ga-68-markierten Neurotensin-Rezeptor-1-Liganden (Ga-NTRL)

Ziel/Aim Neurotensin-Rezeptoren werden überexprimiert in Adenokarzinomen von Pankreas, Dickdarm, Lunge, Prostata oder Brustdrüse. Aktuell gibt es neue Markierungsstrategien für NTRL über carbamoyliertes Arginin (1). Die Plasmastabilität dieser neuen Liganden wurde nachgewiesen (2). Wir wollten einen GMP-fähigen Prozess für die Ga-68-Markierung solcher NTRL entwickeln.

Methodik/Methods Die Ga-68-NTRL wurden vollautomatisiert mit einem Scintomics-GRP-Modul und Ge-68/Ga-68-Generatoren (GAG) (iThemba Labs/EZAG) markiert. Elution, Eluatkonzentrierung und -aufreinigung, Radiomarkierung und Aufreinigung erfolgten mit einem Kassetten-Kit für Ga-68-Peptid-Markierungen (ABX). Der GAG wurde mit 10 ml 0,6 N bzw. 0,1 N HCl eluiert, mit Wasser Ultrapur verdünnt und auf einer Chromafix PS-H⁺-Säule adsorbiert. Die Desorption von Ga-68³⁺ erfolgte mit 1,5 ml 5 M NaCl in den Reaktor mit vorgelegtem NTRL-Precursor (20 µg/100 µl Wasser Ultrapur, 3 ml 1,5 M HEPES; Reaktionsbedingung 125˚C, 6 min). Das Reaktionsgemisch wurde nach kurzer Abkühlung auf eine Sep-Pak Light C18-Kartusche überführt. Nach Spülen mit Wasser zur Entfernung von Ga-68-Chlorid wurde das Produkt mit 2 ml 50 % Ethanol über einen Sterilfilter in ein steriles Typ I-Glasgefäß eluiert und mit PBS-Puffer (pH 7,5) verdünnt (16,6 ml Produktvolumen). In der Qualitätskontrolle von Ga-68-NTRL wurden chemische und radiochemische Reinheit (HPLC/ITLC), Nuklidreinheit, pH-Wert und Halbwertszeit ermittelt, Endotoxingehalt und Sterilität nach Vorgaben der Ph.Eur. geprüft.

Ergebnisse/Results Der Prozess lieferte in < 40 min sterile, pyrogenfreie Ga-68-NTRL mit hoher Ausbeute (> 76 %), radiochemischer Reinheit > 99 %, Ga-68-Kolloid < 1 %, Ga-68-Chlorid < 1 %, Ge-68-Gehalt < 0,001 %, pH 7,5 und Endotoxingehalt < 3 EU/ml.

Schlussfolgerungen/Conclusions Es wurde eine automatisierte, GMP-fähige Herstellung der Ga-68-NTRL mit hoher Ausbeute als reines, steriles Produkt für weitere (prä-)klinische Studien etabliert.

• Literatur/References

• 1 Keller et al.. J Med Chem 2016 , 59. , 1925 .
• 2 Schindler et al. ACS Med Chem Lett 2019; , 10 , 960.