Z Gastroenterol 2018; 56(08): e234-e235
DOI: 10.1055/s-0038-1668740
Kurzvorträge
Pankreas
Pankreas: Sternzellen, Stammzellen, Regeneration – Freitag, 14. September 2018, 14:35 – 15:55, 21a
Georg Thieme Verlag KG Stuttgart · New York

Etablierung und Aktivierung von Sphäroiden hepatischer und pankreatischer Sternzellen

S Mielke
1   Klinik für Viszeral Thorax und Gefäßchirurgie, UKGM Marburg, Marburg, Deutschland
,
T Wissniowski
2   Klinik für Gastroenterologie, Endokrinologie und Stoffwechsel, Marburg, Deutschland
,
T Gress
2   Klinik für Gastroenterologie, Endokrinologie und Stoffwechsel, Marburg, Deutschland
,
D Bartsch
1   Klinik für Viszeral Thorax und Gefäßchirurgie, UKGM Marburg, Marburg, Deutschland
,
P Di Fazio
1   Klinik für Viszeral Thorax und Gefäßchirurgie, UKGM Marburg, Marburg, Deutschland
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Publication History

Publication Date:
13 August 2018 (online)

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Einleitung:

Humane Sternzellen gelten als mitwirkend an der Entstehung einiger Krankheiten. So sind sie auch an dem fibrotischen bzw. zirrhotischem Umbau von Organgewebe in der Leber beteiligt und fördern die Tumorentstehung. Das Pankreas verfügt ebenfalls über Sternzellen, die die Tumorbildung mittels spezieller Autophagiemechanismen begünstigen. Bisher war unbekannt, dass die pankreatischen und hepatischen Sternzellen in der Lage sind in einer 3D-Monozellkultur Sphäroide zu bilden. Diese werden genutzt um die adhäsionsvermittelten Signaltransduktionen in einer organähnlicheren funktionellen Einheit besser nachvollziehen zu können als in 2D-Zellkulturen.

Ziele:

Hier wurden 3D-Monozellkulturen aus hepatischen und pankreatischen Sternzellen etabliert, ihre Aktivierung durch den Transforming Growth Factor beta 1 untersucht und außerdem die Expression des Toll like Rezeptor 5 beobachtet.

Methodik:

Es wuchsen jeweils Sphäroide hepatischer LX-2 Zellen und HPSC 2.2 (Human Pancreatic Stellate Cells) einzeln auf Agarose in 96-Well Platten. Am 3. Tag wurden sie für 48 Stunden mit 2,5 ng/ml TGF-beta 1 behandelt. Ein Nachweis bekannter Aktivierungsmarker erfolgte anhand von RT-qPCR. Die Morphologie wurde mittels Kontrastphase Mikroskopie verglichen.

Ergebnisse:

LX-2 Sternzellen und HPSC Sternzellen bildeten Sphäroide, welche am 3. Tag einen Durchmesser von 300 Mikrometer (LX-2) bzw. 350 Mikrometer (HPSC) besaßen. Sphäroide beider Zelltypen zeigten eine hochregulierte Expression des RNA-Transkripts des Aktivierungsmarkers Kollagen 1 (COL1A1) nach Behandlung mit TGF-beta 1. Bei der weiteren Untersuchung von ACTA2 und SNAI 1 (Zinc Finger Protein SNAI 1) konnten außerdem erhöhte Transkripte bei HPSC Sphäroiden nachgewiesen werden.

Schlussfolgerung:

Die Ergebnisse verdeutlichen anhand eines realistischen Modells durch Sphäroide die Aktivierung humaner Sternzellen durch TGF-beta 1. Die Rolle des TLR 5 Rezeptor wird in diesem Zusammenhang weiter untersucht, im Vergleich zu bisher erfolgten Modellen an mono-layer Zellkulturen, um die Verbindung zwischen Immunsystem und Sternzellen erklären zu können. Es könnte sich um ein neues Ziel bei gastrointestinalen Erkrankungen handeln.