Nichterythrozytengebundene ⁵¹Cr-Aktivität — Neue Befunde zu einer alten Markierungsmethode^[*]

Neben der Ausbeute an markierten Erythrozyten stellt die Reinheit der injektionsfertigen Erythrozytensuspension von nicht erythrozytengebundener Aktivität (dem NE⁵¹Cr) ein wesentliches Gütekriterium der ⁵¹Cr-Markierung dar. Nach Darstellung einer besonders präzisen Methode zur Messung des NE⁵¹Cr werden nicht nur die wesentlichen Einflußgrößen auf das NE⁵¹Cr untersucht, sondern das NE⁵¹Cr verschiedenen Verfahren der Komponententrennung unterzogen. Als Antikoagulans wurde ACD verwendet. Die Resultate zeigen, daß die Chromat-Ionen nach sehr kurzer Zeit (max. 2,5 Min.) praktisch komplett in die Erythrozyten diffundiert sind. Die Inkubationszeit (IKZ: Zeit des Kontaktes von Erythrozyten und ⁵¹Cr) ist von wesentlichem Einfluß auf die Bildung von geladenen und/oder neutralen Chrom(III)- Citrat-Komplexen, die teilweise in die Erythrozyten diffundieren und in den Erythrozyten das Chrom-Ion an andere Bindungspartner verlieren. Die ionenaustauschbaren anionischen Chrom-Citrat-Komplexe überwiegen bei weitem gegenüber neutralen und möglicherweise bestehenden kationischen Komplexen. Ihr Anteil nimmt mit wachsender IKZ zu. Nur etwa die Hälfte der Komplexe liegt in (überwiegend lockerer) Proteinbindung vor, nur ein geringer Teil der Aktivität kann durch äthanol gefällt werden. Unter den Standardbedingungen des Signette-Schnellverfahrens mit Anionenaustauscherreinigung (IKZ: 10 Min.) finden sich NE⁵¹Cr-Werte von ca. 2,5%. Die Auswirkung von abweichenden Bedingungen können einem Nomogramm entnommen werden. Reduzierenden Substanzen im Blut kommt unter extremen Bedingungen eine gewisse Bedeutung zu, z. B. beträgt das NE⁵¹Cr 30 Min. nach 2,5 g L-Ascorbinsäure i.v. 5%. Das in-vivo-Verhalten zeigt für 2/3 dieser Aktivität eine Halbwertszeit von mehr als 24 Std.

Beside the yield of labeled erythrocytes the purity of the suspension of erythrocytes ready for injection from nonerythrocyte activity (NE⁵¹Cr) is an important criterion for the quality of the ⁵¹Cr-labeling method. After presentation of an especially precise method for measuring the NE⁵¹Cr the parameters influencing the NE⁵¹Cr in the main were investigated and the NE⁵¹Cr was analysed using different methods of separation of its components. ACD was used as anticoagulant. The results demonstrate that chromate-ions diffuse into the erythrocyte nearly completely in a very short time (max. 2.5 min). The incubation time (ICT: Time of the contact of erythrocyte and ⁵¹Cr) has an important influence in forming charged and/or neutral chromium (Ill)-citrate-complexes, which diffuse in part into the erythrocyte and lose the chromium ion inside the erythrocyte to other binding partners. The ion exchangeable anionic chromium-citrate-complexes preponderate in main against neutral and possibly existing cationic complexes. This part increases with increasing ICT. Only about the half of the complexes is protein bound (loosely in main), only a minimal part of the activity can be precipitated by ethanol. Using standard conditions in the Signette-method for rapidly ⁵¹Cr-labeling of erythrocytes with purification by an anionexchanger (ICT: 10 min) the NE⁵¹Cr is about 2.5%. The influence of varied conditions can be read from a nomogram. Reducing agents in the blood have some importance in extreme conditions, e. g. after 2.5 g L- ascorbic acid the NE⁵¹Cr is 5%. The in-vivo time course of two thirds of this activity shows a half time of more than 24 hours.

^* Herrn Prof. Dr. K. E. Scheer zum 60. Geburtstag gewidmet.

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