Charakterisierung von CRTC1 (CREB-regulated transcription coactivator 1) im Barrett-Ösophagus

Mittels genomweiter Assoziationsstudien konnten kürzlich genetische Risikofaktoren bei Patienten mit Barrett-Ösophagus und ösophagealem Adenokarzinom (EAC) identifiziert werden (Lancet Oncol 2016 17(10):1663 – 79 und Nat Genet 2013 45(12):1487 – 93)). Hierbei zeigte sich eine signifikante Assoziation im Lokus 19p13 (rs10419226: P = 3,6 × 10^-10) im CRTC1 (CREB-regulated transcription coactivator 1). In einem Barrett-Zellkulturmodell haben wir die molekulare Rolle von CRTC1 in der Pathophysiologie des Barrett-Ösophagus verifiziert und seine Lokalisation in Metaplasie- und EAC-Präparaten untersucht.

Expressionsanalysen mittels qRT-PCR für CRCT1 wurden in 6 Zelllinien (EPC1 und EPC2 (gesundes Plattenepithel), CP-A (Metaplasie), CP-B (Dysplasie) und OE33- und OE19- (EAC) Zellen) durchgeführt, der Einfluss von 5-FU auf die CRTC1-Expression und die Lokalisation von CRTC1 und Phospho-CRTC1 mittels Immunofluoreszenz bestimmt.

Die immunohistologischen Untersuchungen zeigten eine Akkumulation von phospho-CRTC1 (deaktiviertes Form) im Plattenepithel, wohingegen die aktive (dephosphorylierte) Form des CRTC1 hauptsächlich in der Barrett-Mukosa detektiert werden konnte. Das mRNA Transkript für CRCT1 ist lediglich in der dysplastischen Zelllinie CP-B signifikant gegenüber allen anderen Zelllinien erhöht. Eine Behandlung mit 1µM und 10µM 5-FU über 48 bzw. 72h zeigte eine signifikante Erhöhung der CRTC1-Expression in OE33-Zellen. In 5-FU-resistenten OE19-Zellen zeigte sich lediglich unter 10µM 5-FU Behandlung über 72h ein Anstieg der CRTC1 mRNA-Expression.

Die Daten weisen auf eine Beteiligung von CRTC1 bei der Entstehung des Barrett-Ösophagus und des EACs hin. Der 5-FU induzierte Anstieg von CRTC1 in OE33-Zellen und der ausbleibende Anstieg in den 5-FU-resistenten Zellen OE19 lässt eine Beteiligung von CRTC1 bei der Resistenzausbildung des EACs vermuten.