Das Chemokin CX3CL1 verbessert die Lyse von HER2-positiven Mammakarzinomzellen durch Natürliche Killerzellen

Zielsetzung: Die Antikörpertherapie des HER2-positiven Mammakarzinoms erfordert eine ausreichende Infiltration des Tumors mit tumor-suppressiven Lymphozyten, insbesondere natürlicher Killerzellen. Diese binden an die Antikörper auf der Oberfläche der Mammakarzinomzellen und können zytotoxisch aktiv werden – ein Vorgang, der als Antikörper-abhängige zelluläre Zytotoxizität (ADCC) bezeichnet wird. CX3CL1 kann als lösliches Chemokin die NK-Zell-Infiltration in Tumoren chemotaktisch erhöhen. Es wird von Tumorzellen allerdings zunächst als membranständige Form gebildet, von der dann durch Proteasen wie ADAM17 die lösliche Form abgespalten wird. Die membranständige Form könnte jedoch zusätzlich helfen, durch engere Bindung der NK-Zellen an die Tumorzellen deren Lyse zu verbessern. Ziel war es, die Regulation von CX3CL1 und den Einfluss auf die Lyse von HER2-positiven Mammakarzinomzellen zu untersuchen.

Methodik: SK-BR-3-Zellen wurden mit TNF-α, dem ADAM17-Inhibitor TAPI-2 oder einem anti-CX3CL1-Antikörper behandelt. Alternativ wurden sie mit einem CX3CL1-tragenden Vektor transfiziert. Die Expression von CX3CL1 wurde daraufhin mittels Westernblot (zelluläre Form), Durchflusszytometrie (membranständige Form) und ELISA (lösliche Form) bestimmt. Mittels eines Europium-Lyse-Assays konnte der Einfluss der verschiedenen Bedingungen auf die Lyse der Tumorzellen durch Natürliche Killerzellen untersucht werden.

Ergebnisse: SK-BR-3-Zellen exprimieren und sezernieren CX3CL1, dieser Effekt kann durch TNF-α noch weiter erhöht werden. Eine Inhibition von ADAM17 mit TAPI-2 verschiebt diese Expression hin zur membranständigen Form. Sowohl TNF-α als auch TAPI-2 oder eine transiente CX3CL1-Transfektion verbessern die NK-Zell-vermittelte Lyse von SK-BR-3-Zellen. Umgekehrt lässt sie sich durch einen monoklonalen anti-CX3CL1-Antikörper hemmen.

Zusammenfassung: CX3CL1 verbessert die NK-Zell-vermittelte Lyse von HER2-positiven Mammakarzinomzellen und könnte demnach eine pharmakologische Zielstruktur sein, um die Immunintervention im HER2-positiven Brustkrebs weiter zu verbessern.