IRF3/7-Knockout führt zu verminderter Interferon Response in HBs transgenen Mäusen

Einleitung: HBs transgene (HBsTg) Mäuse, die die Oberflächenantigene des Hepatitis B Virus (HBV) exprimieren, entwickeln eine ER-Stress induzierte Leberschädigung [1][2]. Wir haben mittels Microarrayanalyse im Lebergewebe der HBsTg Mäuse eine verstärkte Expression von Interferon type I (α und β)-regulierten Genen nachgewiesen. Diese Gene werden durch die Transkriptionsfaktoren Interferon Regulatory Factor (IRF)3 und IRF7 aktiviert.

Ziele: An einer neu etablierten HBsTg IRF3^-/-/7^-/- Mauslinie sollen die Einflüsse und der potentielle therapeutische Nutzen einer IRF3 und IRF7 Modulation in Bezug auf eine ER-Stress induzierte Leberschädigung analysiert werden.

Methodik: Es wurden sowohl eine IRF3^-/-/7^-/- Mauslinie, als auch ein dreifach veränderter Balb/c Stamm (HBsTg, IRF3^-/-/7^-/-) etabliert. Zur vergleichenden Analyse auf RNA- und Proteinebene wurden mRNA-Array, qRT-PCR, Proteom Profiler, Western Blot und Immunhistochemie verwendet.

Ergebnis: Sowohl die IRF3^-/-/7^-/-, als auch die HBsTg IRF3^-/-/7^-/- Mauslinie ist prima vista gesund und fertil.

Im Mikroarray zeigen HBsTg IRF3^-/-/7^-/- Mäuse im Vergleich mit HBsTg Mäusen eine Herunterregulation Interferon Response assoziierter Gene. So sind ISG15 und Oas1a 8 bis 20fach herunterreguliert. Die Ergebnisse konnten wir mittels q-PCR und Western Blot validieren.

Schlussfolgerungen: Der IRF3^-/-/7^-/- Knockout ermöglicht eine in vivo Untersuchung der Rolle des Interferon Response bei Leberpathologien. Dabei ist vor allem von Interesse, über welche Signalwege HbsAg, unabhängig von viraler DNA, zu einer Aktivierung der Interferon Response Aktivierung führen kann.

Literatur:

[1] Churin Y et al. Plos one 2014

[2] Churin Y, Roderfeld M, Roeb E. Hepatobiliary Surg Nutr. 2015