Entwicklung und Validierung eines Gliadin33-mer basierten Immo-Assays zum Monitoring einer Gluten freien Ernährung

Die konsequente Einhaltung einer Gluten freien Ernährung gilt bis heute als einzige effektive Therapie der Zöliakie. Bis heute fehlen allerdings geeignete Marker zur Kontrolle der Diät-Adhärenz und/oder Überprüfung der etwaiger Glutenkontaminanten, da die in der serologischen Diagnostik eingesetzten IgA- und IgG-basierten Antikörpertests unter einer glutenfreien Diät einen zu protrahierten Abfall aufweisen (bis 1 Jahr).

Ausgehend von der bekanntermaßen hoher Stabilität verschiedener 33-mer Peptide des Gliadins (33mPs) wurde ein auf monoklonalen Antikörpern basierter Sandwich ELISA entwickelt, der nach Ethanolextraktion den Nachweis der entsprechenden Peptide bis zu 0,2 ng/g Stuhl ermöglicht und eine über 2 Zehnerpotenzen reichende lineare Korrelation aufweist. Bei Probanden (n = 5), die 20 – 25 g Gluten/Tag verzehrten, wurden 117,8 (68,6 – 234,1) ng 33mPs/g, bei Patienten/Probanden (n = 5) unter Gluten freier Ernährung 1,8 (0,4 – 3,0) ng 33mPs/g nachgewiesen.

Im untersuchten Probanden- und Patientenkollektiv zeigte der Nachweis 33-mer haltiger Glutenpeptide (33mPs) im Stuhl eine signifikant positive Korrelation mit der jeweils täglich verzehrten Glutenmenge. Der vorgestellte Immuno-Assay ermöglicht somit erstmals ein zeitnahes Monitoring der Einhaltung einer Gutenfreien Ernährung bzw. den Nachweis von etwaigen Glutenkontaminanten.