Z Gastroenterol 2003; 41 - P241
DOI: 10.1055/s-0035-1555442

Transfektion von siRNA gegen bcl-xl in Hepatomzellen führt zu einer Sensitivierung gegenüber chemotherapieinduzierter Apoptose

M Waltemathe 1, S Hütker 1, L Zender 1, F Kühnel 1, MP Manns 1, S Kubicka 1
  • 1Department of Gastroenterology, Hepatology and Endocrinology, Medical School Hannover, Germany

Einleitung: Das hepatozelluläre Karzinom zeichnet sich durch eine extreme Resistent gegenüber Apoptosestimuli, wie z.B. Chemotherapie aus. Die verschiedenen Mechanismen der der Apoptoseinhibition der HCC's sind noch unzureichend verstanden. Eine Überexpression des antiapoptotischen bcl-2 Familienmitglieds bcl-xl scheint eine maßgebliche Rolle in der Apoptoseresistenz von HCC's zu spielen.

Methodik: Hepatomzellen wurden entweder mittels bcl-xl antisense Oligonukleotiden oder mittels bcl-xl-siRNA transfiziert. siRNA Applikation und Applikation von Antisense Oligonukleotiden wurden hinsichtlich ihrer Effektivität der Senkung des bcl-xl Expressionslevels durch Western-Blot-Analyse oder Immunfluoreszenz verglichen. Die äußerst effektive Technik der RNA-Interferenz wurde nachfolgend hinsichtlich einer möglichen Sensitivierung gegenüber chemotherapieinduzierter Apoptose und Adp53-VP22 induzierter Apoptose untersucht.

Ergebnisse: Im Vergleich zur herkömmlichen Antisense-Technologie ist die siRNA vermittelte Hemmung von bcl-xl deutlich effektiver und weniger toxisch. Die maximal erreichbare Senkung des bcl-xl-Proteinlevels liegt für die antisense-Oligonukleotide bei maximal 30–40%. Durch RNA-Interferenz hingegen kann eine Senkung des bcl-xl Proteinlevels um den Faktor 4–5 erzielt werden. Die Transfektion von siRNA in Hepatomzellen führt zu einer signifikanten Sensitivierung gegenüber chemotherapieinduzierter Apoptose. Auch ist eine Durchbrechung der Resistenz gegenüber p53-Gentherapie mittels siRNA-bcl-xl zu erreichen. Selbst HepG2-Hepatomzellen, die sich aufgrund ihres p53-wt-Status durch Resistenz gegenüber p53-Gentherapie auszeichnen, lassen sich hierfür durch siRNA-bcl-xl sensitivieren.

Diskussion: In zukünftigen Untersuchungen wird zu zeigen sein, inwieweit analog zur schon gezeigten effektiven Aufnahme der siRNA-Moleküle in die gesunde Leber eine Aufnahme auch in Hepatozelluläre Karzinome und andere Tumore möglich ist.