Azathioprin, 6-Mercaptopurin und 6-Thioguanin hemmen die Proliferation intestinaler Epithelzellen in vitro

Hintergrund/Einleitung: Erosionen und Ulzerationen sind Charakteristika chronisch-entzündlicher Darmerkrankungen (CED). Die Migration (Restitution) und Proliferation von Epithelzellen sind wichtige Wundheilungsmechanismen der Darmmukosa; auch die Apoptose von Epithelzellen kann die Wundheilung beeinflussen. Obwohl Azathioprin (AZA) und 6-Mercaptopurin (6-MP) etablierte Pharmaka in der CED-Therapie sind, ist unklar, ob und welchen Einfluss diese Substanzen auf das Darmepithel ausüben.

Zielsetzung: Ziel dieser Studie war es, die Effekte von AZA und der Metabolite 6-MP und 6-Thioguanin (6-TG) auf die Restitution und das Wachstum intestinaler Epithelzellen zu analysieren.

Material und Methoden: Humane Colonepithelzellen (Caco-2) wurden für 24h mit AZA, 6-MP oder 6-TG in Konzentrationen von 0,01–10µM inkubiert. Die Migration von Caco-2 Zellen wurde mithilfe eines etablierten Restitutionsassays gemessen. Zur Bestimmung der Caco-2-Zellproliferation diente die Messung der [³H]-Thymidin-Inkorporation in DNA. Die Apoptose wurde mittels Durchflusszytometrie Propidiumjodid-gefärbter Caco-2-Zellen sowie Histon-ELISA bestimmt.

Ergebnisse: AZA, 6-MP sowie 6-TG hemmen dosisabhängig die Proliferation von Caco-2-Zellen. Maximale antiproliferative Effekte betrugen für AZA (10µM) 77% (p<0,0001, T-Test), für 6-MP (5µM) 88% (p=0,0002) und für 6-TG (5µM) 82% (p=0,0001). Im Gegensatz dazu wurden weder die Migration noch die Apoptose von Caco-2-Zellen durch diese Substanzen beeinflusst.

Schlussfolgerung: Azathioprin und dessen Metabolite 6-Mercaptopurin und 6-Thioguanin hemmen dosisabhängig die Proliferation intestinaler Epithelzellen in vitro. Demgegenüber haben diese Substanzen keine signifikanten Effekte auf die Migration oder die Apoptose von Darmepithelzellen.