Diabetologie und Stoffwechsel 2013; 8 - P176
DOI: 10.1055/s-0033-1341836

Funktionelle Relevanz der Stop-Codon Mutation rs61757459 in Vaspin (SerpinA12)

J Breitfeld 1, JT Heiker 1, Y Böttcher 1, D Schleinitz 1, A Tönjes 1, K Weidle 1, K Krause 1, EB Küttner 1, W Kieß 1, N Sträter 1, AG Beck-Sickinger 1, M Stumvoll 1, A Körner 1, M Blüher 1, P Kovacs 1
  • 1Universität Leipzig, Leipzig, Germany

Fragestellung: Das Adipokin Vaspin stellt eine mögliche Verbindung zwischen Insulinresistenz, Adipositas und Typ 2 Diabetes dar. Eine kürzlich publizierte genomweite Assoziationsstudie zeigt, dass genetische Varianten im Vaspin-Gen zur individuellen Variabilität der Serumkonzentrationen beitragen könnten. In der hier vorliegenden Studie werden funktionelle Konsequenzen der seltenen Stop-Codon Variante rs61757459 im Vaspin untersucht.

Methoden: Das Vaspin-Gen wurde zunächst in 48 nicht-verwandten Kaukasiern sequenziert und rs61757459 als Stop-Codon identifiziert. Es folgte die Genotypisierung von rs61757459 in 3 deutschen, klinisch gut charakterisierten Kohorten (Sorben Kohorte, Leipzig Kohorte, Leipzig Kinder Kohorte; N = 4019). Um den Einfluss der Variante auf die Vaspin-Expression zu bestimmen wurden anschließend in vivo und in vitro Experimente in verschieden Zelllinien (E. coli, HEK293) durchgeführt. Weiterhin wurde die Struktur des verkürzten Vaspinproteins analysiert.

Ergebnisse: Die Sequenzierung des Vaspins führte zur Identifikation der seltenen Stop-Codon Variante (rs61757459; Häufigkeit 1%) die in einem verkürzten Protein resultiert (p.R211X, 24.5 kDa). Träger dieser Mutation zeigen im Vergleich zu Nichtträgern niedrigere Serumvaspinspiegel. Das verkürzte Protein konnte mittels rekombinanter Expression in E. coli und HEK293-Zellen, jedoch nicht im Serum humaner Mutationsträger nachgewiesen werden. Strukturanalysen lassen aufgrund des Fehlens wichtiger Strukturdomänen (4 Helices, multiple ß-Stränge, reaktiver Centerloop) ein fehlgefaltetes, instabiles Protein vermuten.

Schlussfolgerung: Unsere Analysen weisen darauf hin, dass rs61757459 mit verminderten Serumvaspinspiegeln assoziiert, was vermutlich auf der Expression eines instabilen verkürzten Proteins basiert.

Funding: DFG KO3880/1 – 2