Nicht Invasive Bestimmung des HER2 Status mittels Digitaler PCR an freizirkulierender Tumor DNA in dem Plasma metastasierter Brustkrebspatientinnen

Zielsetzung: Die digitale PCR (dPCR) ist eine hochakkurate Methode zur Bestimmung der DNA Konzentration. Wir haben die dPCR dahingehend modifiziert onkogene Amplifikation, speziell die HER2 Amplifikation, an frei zirkulierender Tumor DNA im Plasma anzuzeigen. Studien haben gezeigt das der HER2 Status sich in 5–10% in der Rezidiv Situation ändert. Für die Therapieplanung ist der HER2 Status entscheidend. Die Bestimmung an frei zirkulierender Tumor DNA ist eine nicht invasive Methode. Wir zeigen den Ansatz für die Detektion bereits geringer Veränderungen der HER2 Kopienzahl in metastasierten Mammakarzinompatientinnen.

Materialien/Methoden: Entwicklung eines dPCR Assays für die HER2 Kopienzahl an frei zirkulierender Tumor DNA in Plasma. Die Testparameter wurden in einer Pilotkohorte, 44 Patienten, die diagnostische Genauigkeit in einer prospektiv gesammelten unabhängigen Validationskohorte, 33 Patienten, mit metastasiertem Brustkrebs getestet. In der Validationskohorte, wurde der Sequentielle Wahrscheinlichkeits Ratio Test angewandt um die Probe als HER2 positiv oder HER2 negativ einzuordnen.

Ergebnisse: In der Pilotkohorte war das HER2:UBBP4 (Referenzprobe) Verhältnis im Plasma substanziell erhöht in den HER2 amplifizierten Fällen (median 2.231, range 1.138–7.89) verglichen mit den HER2 negativen Fällen (median 1.046, range 0.7–1.245, p<0.001). In der Validationskohorte, 88% (7/8) der HER2 amplifizierten Fälle sind als positiv in der dPCR und 84% (21/25) der HER2 nicht amplifizierten Fälle sind in der dPCR als negativ gewertet worden. Negativ prädiktiver Wert 95%.

Zusammenfassung: Die dPCR an frei zirkulierender Tumor DNA in Plasma hat das Potential den HER2 Status bei metastasierten Brustkrebspatientinnen zu bestimmen.