Microdialysis of Melatonin in the Confluens sinuum of the Rat Following Quantification by Gas Chromatography-Mass Spectrometry in the Negative Chemical Ion Mode

Summary

In this study, an original surgical implantation technique in the confluens sinuum via the superior sagittal vein was developed to quantify melatonin secretion by the pineal gland.

Melatonin (CAS 73-31-4) was determined using gas chromatography couples to negative ion chemical ionisation mass spectrometry following liquid extraction and derivatisation by pentafluoropropionic acid anhydride (PFPA). The minimum detectable amount was 40 fg per injection, corresponding to 1 pg · ml⁻¹ in dialysate. The assay was linear in the range 20-1000 pg · ml⁻¹. This method was suitable for routine melatonin determination in dialysats of peripheral and central circulation with coefficients of variation of 11.2 and 24.6%, respectively for within and between analyses. Profiles of melatonin concentration were obtained (n = 3 rats) over a 2-day experimentation with a slowly diminution of the filtration capacity of the probe during the second day. The nocturnal concentrations of melatonin in the confluens sinuum dialysat ranged from 1003.9 to 2345 pg · ml⁻¹ in the dialysat, indicating wide interindividual variations in the melatonin levels.

Zusammenfassung

Mikrodialyse von Melatonin im Confluens sinuum der Ratte nach Quantifizierung durch Gaschromatographie-Massenspektrometrie mit negativer chemischer Ionisierung

In dieser Studie wurde eine operative Implantationstechnik in den Confluens sinuum über die obere sagittale Vene entwickelt um die Melatonin-Ausscheidung der Zirbeldrüse zu quantifizieren. Melatonin (CAS 73-31-4) wurde mit Hilfe der Gaschromatographie-Massenspektrometrie mit negativer chemischer Ionisierung nach Flüssigkeitsextraktion und Derivatisierung mittels Pentafluorpropionsäureanhydrid bestimmt. Die untere Nachweisgrenze betrug 40 fg pro Injektion, was 1 pg · ml⁻¹ in Dialysat entsprach. Der Nachweis war im Bereich von 20-1000 pg · ml⁻¹ linear. Diese Methode eignete sich für Routine-Melatonin-Bestimmungen in Dialysaten des peripheren und zentralen Kreislaufs, mit Variationskoeffizienten von 11,2 bzw. 24,6% für Intraund Interassay-Variationen. Melatonin-Konzentrationsprofile wurden über 2 Tage erstellt (n = 3 Ratten). Eine leichte Abnahme der Filtrationsrate der Sonde zeigte sich im Verlauf des zweiten Tages. Die nächtlichen Konzentrationen von Melatonin im Confluens sinuum- Dialysat lagen im Bereich von 1003,9 bis 2345 pg · ml⁻¹, was auf weite individuelle Schwankungen des Melatonin-Spiegels hinweist.

Key words

CAS 73-31-4 - Confluens sinuum - Melatonin, microdialysis, quantification of secretion by the pineal gland