Mutagenicity of Recombinant Antihemophilic Factor (GC-γAHF)

Summary

This study was carried out to evaluate the mutagenic potential of recombinant antihemophilic factor VIII (GC-γAHF). Salmonella typhimurium (S. typhimurium) reversion assay with/without histidine moiety, chromosomal aberration assay on Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cells and in vivo micronucleus assay using mouse bone marrow cells and supravital micronu-cleus assay using peripheral blood were performed. GC-γAHF containing histidine did show inconsistent and irregular mutagenic effects on S. typhimurium TA98, TA100, TA1535 and TA1537 both in the absence and presence of the metabolic activation system, however, GC-γAHF without histidine showed no mutagenic effects regardless of the metabolic activation system, thus suggesting that the histidine moiety in GC-γAHF might cause inconsistent mutagenic effect. Also GC-γAHF did not increase the number of cells having structural or numerical chromosome aberration in the cytogenetic test. In classical and supravital micronucleus assay, no significant increases were observed in the occurrence of micronucleated polychromatic erythrocytes and micronucleated peripheral lymphocytes in male ICR mice. These results strongly indicate that GC-γAHF has no genetic toxicity under these experimental conditions.

Zusammenfassung

Mutagenität von rekombinantem antihämophilem Faktor VIII (GC-γAHF)

Ziel dieser Studie war es, das mutagene Potential von rekombinantem antihämophilem Faktor VIII (GC-γAHF) zu bewerten. Folgende Tests wurden durchgeführt: Salmonella typhimurium (S. typhimurium)- Revesionstest mit/ohne Histidin, Chromosomenaberrations-Test mit chinesischen Hamsterlungen (CHL)-Fibroblastenzellen, In-vivo-Mikronukleustest mit Knochenmarkzellen der Maus sowie der supravitale Mikronukleustest mit peripherem Blut. Histidin enhaltender GC-γAHF zeigte sowohl mit als auch ohne metabolische Aktivierung bei S. typhimurium TA98, TA100, TA1535 und TA1537 inkonsistente und irreguläre mutagene Wirkungen. Dagegen zeigte GC-γAHF ohne Histidin ungeachtet einer metabolischen Aktivierung keine mutagene Wirkung, was vermuten läßt, daß das Histidin-Molekül in GC-γAHF eine inkonsistente mutagene Wirkung induziert. GC-γAHF erhöhte nicht die Anzahl der Zellen mit strukturellen oder numerischen Chromosomen-Aberrationen im zytogenetischen Test. Im klassischen sowie im supravitalen Mikronukleustest wurde keine signifikante Zunahme von mikronukleierten polychromatischen Erythrozyten und mikronukleierten peripheren Lymphozyten bei männlichen ICR-Mäusen festgestellt. Diese Ergebnisse legen die Vermutung nahe, daß GC-γAHF unter den gegebenen experimentellen Bedingungen keine genetische Toxizität besitzt.

Key words

Antihemophilic factor, Ames test, chromosomal aberration assay - micronucleus assay, supravital micronucleus assay