Der anti-inflammatorische Mediator GILZ ist ein negativer Regulator der TLR2 Expression im Gefäß

Einleitung: Vaskuläre Entzündungsprozesse sind wesentlich durch eine Aktivierung des Mustererkennungsrezeptors Toll-like Rezeptor 2 in Endothelzellen und Makrophagen charakterisiert. GILZ (glucocorticoid-induced leucine zipper) ist ein anti-inflammatorischer Regulator der Genexpression, dessen Downregulation in verschiedenen Entzündungsprozessen beschrieben wurde. Ziel der Arbeit war es, die Rolle von GILZ in entzündlichen Prozessen des Gefäßes zu charakterisieren.

Methoden: GILZ und TLR2 wurde in kultivierten Zellen sowie in gesunden Venen bzw. arteriosklerotischen Venenbypässen mittels real-time RT-PCR (mRNA) nachgewiesen. Ein GILZ Knockdown erfolgte mittels siRNA Transfektion, eine NF-κB Hemmung mithilfe von decoy Oligonukleotiden.

Ergebnisse: Arteriosklerotische Venenbypässe (n=15), die eine inflammatorische Zellaktivierung aufwiesen (erhöhte MCP-1 Spiegel), enthielten im Vergleich zu gesunden Venen (n=23) signifikant verringerte mRNA Spiegel von GILZ (p=0.0056). Sowohl in humanen Nabelschnurendothelzellen (HUVEC) als auch in PMA-differenzierten THP-1 Makrophagen nahm GILZ in einer durch TNF-α induzierten Inflammation ab. Gleichzeitig wurde in Endothelzellen eine Induktion von TLR2 beobachtet, wie sie auch in arteriosklerotischen Venenbypässen auftrat. Untersuchungen zur funktionellen Bedeutung der GILZ-Downregulation mittels GILZ siRNA zeigten, dass sowohl in HUVEC als auch in in vitro differenzierten Makrophagen die TLR2 Expression anstieg. Dafür verantwortlich scheint eine Interaktion mit der Aktivierung des NF-κB Signalwegs zu sein: mittels Decoy Transfektion wurde eine NF-κB-abhängige TLR2 Expression belegt. Ein GILZ Knockdown induzierte bzw. verstärkte sowohl in Makrophagen als auch in Endothelzellen die Aktivierung von NF-κB.

Diskussion: Unsere Daten zeigen erstmals, dass im entzündeten Gefäß der anti-inflammatorische Regulator GILZ vermindert exprimiert wird. Funktionell führt eine verringerte GILZ Expression sowohl in Endothelzellen als auch in Makrophagen, den beiden wesentlichen Zelltypen einer vaskulären Inflammation, zu erhöhten TLR2 Spiegeln. Verringerte GILZ Spiegel scheinen somit kausal an Entzündungsprozessen im Gefäß beteiligt zu sein.

This work was funded by the Deutsche Forschungsgemeinschaft (KI702).