Anti-TNF Antikörper führen zur Aufhebung der TNFR2 und CD14+ Makrophagen vermittelten Apoptoseresistenz in lamina propria T-Zellen bei chronisch entzündlichen Darmerkrankungen

Einleitung: Die anti-TNF Antikörper stellen eine wichtige Behandlungsoption in der Therapie der chronisch entzündlichen Darmerkrankungen (CED) dar. Der Wirkmechanismus dieser Substanzen ist aber weiterhin nicht ausreichend bekannt.

Ziel: Das Ziel dieser Arbeit ist die Analyse des molekularen Wirkmechanismus der anti-TNF Antikörper bei CED und die Charakterisierung der beteiligten Signaltransduktionswege.

Methodik: Die Expression verschiedener Oberflächenmarker, sowie die Apoptoserate kultivierter Zellen wurden mittels Immunhistochemie und Durchflusszytometrie bestimmt. Des Weiteren erfolgte die Analyse von Signaltransduktionsfaktoren durch RT-PCR, Western-Blot und Gel-Shift Assays.

Ergebnis: Intestinale CD14+ Makrophagen bei CED wiesen eine signifikant höhere mTNF-Expression im Vergleich zu CD4+ T-Zellen auf, während die mTNF-abhängigen Signalproteine TNFR2, TRAF2 and NF-kappaB in lamina propria CD4+ T-Zellen verstärkt exprimiert wurden. Die meisten anti-TNF Antikörper konnten keine T-Zell Apoptose in peripheren oder mukosalen CD4+ T-Zellen von CED Patienten in vitro induzieren. Dagegen konnte bei allen in der Therapie der CED erfolgreich eingesetzten anti-TNF Antikörper, im Gegensatz zu Etanercept, eine signifikante Apoptoseinduktion in intestinalen CD4+ T-Zellen in co-Kultur mit mTNF+ CD14+ Makrophagen beobachtet werden. Abweichend davon zeigte sich keine Apoptoseinduktion in intestinalen CD4+ T-Zellen von Kontrollen oder in der Behandlung peripherer mononukleärer Zellen des Blutes. Nach erfolgter anti-TNF Therapie mit Adalimumab oder Infliximab konnte in vivo ebenfalls eine Apoptoseinduktion mukosaler T-Zellen bei CED-Patienten beobachtet werden. Diese Effekte waren abhängig vom TNFR2-, aber nicht vom TNFR1-Signaltransduktionsweg und konnten durch Aktivierung der IL-6 vermittelten Signaltransduktion blockiert werden.

Schlussfolgerung: Alle klinisch effektiven anti-TNF Antikörper können in der co-Kultur von lamina propria TNFR2+ T-Zellen mit mTNF+ CD14+ Makrophagen eine T-Zell Apoptose induzieren. Diese Ergebnisse weisen erstmalig eine indirekte Apoptoseinduktion von T-Zellen durch anti-TNF Antikörper mittels Inhibition des mTNF/TNFR2 Signaltransduktionsweges bei CED nach und tragen somit zu einem verbesserten Verständnis der Immunpathogenese bei.