Geburtshilfe Frauenheilkd 2011; 71 - P514
DOI: 10.1055/s-0031-1278634

Expression von Her4-Rezeptor-Splicevarianten in triple negativen Mammakarzinomen

A Machleidt 1, S Seitz 1, M Mögele 1, S Buchholz 1, G Brockhoff 1, O Ortmann 1
  • 1Klinik für Frauenheilkunde und Geburtshilfe der Universität Regensburg

Zielsetzung:

Triple negative Mammakarzinome (triple negative breast cancer, TNBC) sind diagnostisch negativ für die Her2-Rezeptor-Tyrosin-Kinase den Östrogen-, sowie den Progesteronrezeptor. Damit fehlen dieser prognostisch ungünstigen Subgruppe der Mammakarzinome die ‘klassischen’ Therapietargets für z.B. eine endokrine oder Antikörper-basierte anti-Her2 Therapie. Ein mögliches, molekulares Angriffsziel in TNBC ist der sogenannte Her4-Rezeptor, der zur Familie der Rezeptor-Thyrosin-Kinasen gehört.

In einem Kollektiv von triple negativen Mammakarzinomen und zugehörigem Normalgewebe (matched pair) wurde erstmals eine Analyse der vier bekannten Her4-Splicevarianten durchgeführt.

Material und Methoden:

An ca. 90 Gewebeproben von triple negativen Mammakarzinomen wurden mittels qPCR die Her4 Splicvarianten JMa, JMb (JM=juxtamembran), sowie Cyt1und Cyt2 (Cyt=zytosolisch) untersucht.

Zunächst erfolgte die RNA Extraktion aus paraffin- und kryokonserviertem Material (Qiagen). Nachfolgend wurde mittels reverser Transkription cDNA hergestellt und schließlich am Light Cycler 480 eine qRT-PCR durchgeführt (Roche).

Ergebnisse:

Bei der Expression der juxtamembranen Domäne zeigt sich, dass ausschließlich die JMa Variante in TNBC und dazugehörigem Normalgewebe exprimiert wird. JMb, welches beispielsweise in Myokard vermehrt nachzuweisen ist, findet sich nicht. Das Ausmaß der relativen JMa-Expression variiert in den benignen Kontrollproben bis zu ca. 6-fach, in den malignen Gewebsproben bis ca. 2,5-fach.

Sowohl die zytosolische Domäne Cyt1, wie auch die Cyt2-Domäne werden bei Vorhandensein von JMa in verschiedenen Ausprägungen exprimiert.

Ausblicke:

Nach vollständiger Analyse des zur Verfügung stehenden Kollektives erfolgt eine statistische Auswertung mithilfe der klinischen Daten, die vom Tumorzentrum Regensburg zur Verfügung gestellt werden. Mit dieser Auswertung soll ein möglicher prädiktiver Charakter von Isoformen des Her4 Rezeptors evaluiert werden. Zudem kann die Splicevariantenanalyse in Kombination mit funktionellen Untersuchungen mögliche, neue Angriffspunkte für eine target spezifische Therapie beim TNBC offenlegen.