Veränderung der intrazellulären Glykosyltransferasenkonzentration während der Embryonalentwicklung

Fragestellung: Die Rekrutierung von Leukozyten im Rahmen von Entzündungsprozessen folgt bei Erwachsenen einer vorgegebenen Kaskade von Ereignissen, die mit dem Selektin-abhängigen Rollen von Leukozyten entlang der Gefäßwand beginnt. Hierbei binden Selektine, die auf dem Gefäßendothel exprimiert werden an fukosylierte und sialylierte Glykostrukturen (Sialyl Lewis X), die sich an der Oberfläche von Leukozyten befinden. Nachfolgend kommt es dann zur Integrin-vermittelten festen Leukozytenadhäsion und schließlich zu Auswanderung ins Gewebe. Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurde nun untersucht, ob bei der fetalen Entwicklung die Expression von Adhäsionsmolekülen und Glykosyltransferasen wie beim Erwachsenen reguliert sind.

Material und Methoden: Aus dem Blut LyE-GFP-positiver transgener Mäuse (Reportermäuse für PMN) der Altersklassen E13 (13 Tage nach Konzeption), E15 und Adult, wurden GFP-positive Zellen (neutrophile Granulozyten, PMN) isoliert, die mRNA extrahiert und eine reverse Transkription durchgeführt. Zur Quantifizierung der Glykosyltransferasen wurde eine Real-Time-PCR durchgeführt und die Ergebnisse mittels der ΔΔct-Methode analysiert. Dabei wurden zur Standardisierung die beiden housekeeping-Gene B2M und Gyk verwendet.

Ergebnisse: Unsere Untersuchungen zeigen, dass die mRNA Expression von Selpl (PSGL-1) und Il8rb (CXCR2) im Verlauf der fetalen Entwicklung ansteigt, während sich die Expression verschiedener Glykosyltransferasen (Gnct, St3gal4, kodierende Gene für core 2 GlcNAcT-1 und ST3Gal-IV) sowie Itgal (LFA-1) im Verlauf nicht ändern.

Schlussfolgerung: Ein Anstieg in der RNA Expression von Selpl und Il8rb können die kürzlich berichtete beeinträchtigte Adhäsionsfähigkeit fetaler Leukozyten während der Fetalentwicklung in der Maus erklären und somit auch das erhöhte Auftreten neonataler Infektion v.a. bei sehr kleinen Frühgeborenen erklären