Senologie - Zeitschrift für Mammadiagnostik und -therapie 2011; 8 - A27
DOI: 10.1055/s-0031-1278029

Mechanismen der Tumorprogression: Molekularer Nachweis und Funktion zirkulierender tumorassoziierter mesenchymaler Zellen im Blut

A de Albuquerque 1, 2, S Kaul 3, B Hofmann 3, N Fersis 1
  • 1Klinikum Chemnitz, Klinik für Frauenheilkunde und Geburtshilfe, Chemnitz, Deutschland
  • 2TU Dresden, Pathologisches Institut, Dresden, Deutschland
  • 3Zentrum für Diagnostik, Tumorbiologisches Labor, Chemnitz, Deutschland

Fragestellung: Endoglin (CD105) ist hochselektiv in mesenchymalen Stromazellen und endothelialen Zellen (MSE) des Gefäßsystems und des Stromas von Tumoren exprimiert. Merkmale der Immuntoleranz, Invasion, Chemosensitivität und der Tumorprogression beruhen auf der Kooperativität von Tumorzellen und MSE. Wir beschreiben die Entwicklung einer hocheffizienten immunmagnetischen Selektionsmethode für MSE im Blut.

Methoden: Aus Blutproben (10ml) wurden zirkulierende Tumorzellen (CTC) mittels immunmagnetischer Partikel (Dynal DB) angereichert. Zielantigene waren die Membranproteine MUC-1 und EpCAM. Der Endoglin (CD105) spezifische Klon 266 (BD Pharmingen,UK) wurde an 4µm Dynabeads gekoppelt und zur Isolierung der MSE-Fraktion in Parallelproben eingesetzt. In einer qPCR wurden in der CTC-Fraktion die Marker Cytokeratin 19 (CK19), Mammaglobin 2 (MG2), Epitheliales Membranatigen (EpCAM), Survivin (Sur), CEA und CD105 gestimmt. In der MSE-Fraktion wurden die Marker CD105, EpCAM, CD44, CD144, CD276 und Vimentin bestimmt.

Ergebnisse: Die Empfindlichkeit des MSE-Analyse liegt bei 2 Endothelzellen b.z.w. Stromazellen in 5ml Blut. CTC und MSE wurde parallel in 48 Patienten mit metastasierten Adenokarzinomen mit den überlappenden Markersets bestimmt. In der CTC-Fraktion waren 64,6% der Proben positiv, wobei keine Probe signifikante CD105 Expression zeigte. In der MSE-Fraktion wurden 23 CD105 positive Proben (47,9%) bestimmt. 21 der 31 CTC positiven Blutproben (68%) waren MSE positiv. In dieser Gruppe zeigten alle Proben die Koexpression von CD44 während 7 Proben zusätzlich den Markers der tumorassoziierten Angiogenese CD276 exprimierten.

Diskussion: Wir haben eine neues immunmagnetisches Selektionsverfahren zur Anreicherung und molekularen Charakterisierung von metastasenassoziierten mesenchymalen Zelltypen im Blut entwickelt. Dieser Ansatz kann wichtige Fragen der komplexen Interaktion von Makrophagen, Fibroblasten und Endothelzellen im Tumormikromilieu klären.