Z Gastroenterol 2009; 47 - P365
DOI: 10.1055/s-0029-1241611

Korrelation von malignitätsassoziierten MMPs und TLR-9 in humanen kolorektalen Karzinomzellen

J Stöckle 1, T Rath 1, M Roderfeld 1, A Tschuschner 1, E Roeb 1
  • 1Justus-Liebig-Universität Gießen, Medizinische Klinik II, Schwerpunkt Gastroenterologie, Gießen, Germany

Einleitung und Zielsetzung: Matrix Metalloproteinasen (MMP) sind entscheidend am Wachstum und an der Metastasierung maligner Tumoren beteiligt 1. In unserer Arbeitsgruppe konnte gezeigt werden, dass invasive kolorektale Karzinome (KRK) u.a. MMP-7 und MMP-13 vermehrt exprimieren. Die Beteiligung der erst 2001 klonierten MMP-28 an der kolorektalen Karzinogenese ist bislang nur unzureichend untersucht. Neuere Studien belegen, dass die Stimulation von TLR-9 in Brust- und Prostatakrebszellen zu einer MMP13-vermittelten Steigerung der Zellinvasivität führt. Das Ziel der vorliegenden Arbeit war die Untersuchung des Zusammenhanges zwischen der Expression von TLR-9 und den malignitätsassoziierten Proteasen MMP-7 und -13 sowie die Quantifizierung der MMP-28 Expression in humanen KRK-Zelllinien.

Material und Methoden: Aus den humanen KRK Zelllinien LS174, CaCo, SW620 und HT-29 wurde Gesamt-RNA isoliert und in cDNA umgeschrieben. Die Genexpression von TLR-9, MMP-7, -13 und -28 wurde mittels spezifischer Primer in der Realtime-PCR untersucht. Die Ergebnisse wurden auf 18sRNA als Housekeeping-Gene sowie auf die jeweilige Genexpression in der Kolonfibroblastenzelllinie CCD18 normiert.

Ergebnisse: MMP-7, MMP-13 und MMP-28 werden in allen Kolonkarzinomzellen auf transkriptioneller Ebene stark vermehrt exprimiert. TLR-9 wird in LS174 Zellen im Median 29fach vermehrt gebildet, in SW620 Zellen zeigte sich eine 22fache Expressionssteigerung. In LS174 Zellen besteht eine positive Korrelation zwischen der Expression von TLR-9 und MMP-7 und -13 (r=0,714, p=0,053 bzw. r=0,714, p=0,111).

Schlussfolgerung:

  • Neben MMP-7 und -13 wird auch MMP-28 von allen untersuchten KRK-Zelllinien stark vermehrt exprimiert. Damit scheint MMP-28 wesentlich an der Karzinogenese des KRK beteiligt zu sein.

  • Die positive Korrelation zwischen TLR-9 und MMP-7 und -13 weist auf ein abhängiges Regulationsverhalten dieser Faktoren hin. Dieses wird in Untersuchungen mit selektiver TLR-Stimulation weiter analysiert.

Referenz:

[1] Roeb E et al. The matrix metalloproteinase 9 (mmp-9) hemopexin domain is a novel gelatin binding domain and acts as an antagonist. J Biol Chem 2002;277(52):50326–32.