Effekte von Galectin-1 auf die Syncythiumbildung in Trophoblastzellen BeWo und Humanen Villösen Trophoblastzellen in vitro

Fragestellung: Galectin-1 (Gal-1) ist ein Vertreter der humanen β-Galaktosid-bindenden Proteine, welches bevorzugt Galβ1–4GlcNAc Sequenzen in Oligosaccharidstrukturen erkennt, die mit einer Reihe von sezernierten und Zellmembran-Glykoproteinen assoziiert sind. Ziel der Arbeit war zu untersuchen, inwiefern Gal-1 die Syncythiumbildung in Trophoblasttumorzellen BeWo sowie in humanen Dritt-Trimester-Trophoblastzellen (HVT) beeinflusst. Methodik: Trophoblasttumorzellen BeWo wurden mit den zwei unterschiedlich fluoreszierenden Farbstoffen DiO (grün) und DiI (rot) markiert und mit rekombinantem Gal-1 in der Konzentration 60µg/ml für die Dauer von 48 Std. auf 24-Well-Platten inkubiert. Mithilfe der Fluoreszenzmikroskopie konnte das Fusionsverhalten der Zellen anhand der Fusion der beiden Fluoreszenzfarbstoffe (Gelbfärbung) untersucht werden. Ebenso wurden humane Dritt-Trimester-Trophoblastzellen (HVT) angefärbt und für die Dauer von 96 Std. mit Gal-1 in selbiger Konzentration inkubiert sowie im Anschluss fluoreszenzmikroskopisch untersucht. Zusätzlich erfolgten immunzytochemische Untersuchungen mithilfe von Antikörpern gegen E-Cadherin und beta-Cathenin. Ergebnisse: Bei Tumortrophoblastzellen BeWo erhöhte sich der Anteil fusionierter Zellen der Stimulationsgruppe verglichen mit einer Kontrollgruppe ohne Stimulation um den Faktor 3,2. Bei Dritt-Trimester-Trophoblastzellen HVT war der Anteil fusionierter Zellen der Stimulationsgruppe im Vergleich zu der Anzahl fusionierter Zellen einer Kontrollgruppe um den Faktor 1,7 erhöht. Diese Ergebnisse wurden durch die immunzytochemischen Untersuchungen bestätigt. Mit der Fusionierung der BeWo-Zellen, bzw. der HVT ist die Expression von E-Cadherin und beta-Cathenin verringert. Schlussfolgerung: Gal-1 stimuliert die Syncythiumbildung der Trophoblastzellen BeWo und HVT signifikant. Damit wurde Gal-1 als ein wichtiger plazentarer Faktor der Syncythiumbildung identifiziert. Der Nachweis der Zellfusion erfolgte sowohl indirekt (Immunzytochemie) als auch direkt (Farbstoff-Spektral-Überlagerung). Die Expression von Gal-1 ist bei pathologischen Schwangerschaftsverläufen moduliert, damit scheint Gal-1 ein wichtiger plazentarer Faktor insbesondere für die Syncythiumbildung zu sein.