Hemmung der Progression von Mammakarzinomen durch Thrombospondin–2 über CD36-abhängige Apoptoseinduktion von Endothelzellen

Thrombospondin–2 (TSP–2) ist ein potenter endogener Angiogenesehemmer. Der Wirkmechanismus von TSP–2 ist kaum geklärt. Wir entwickelten ein rekombinantes 80 kDa N-terminales Proteinfragment von TSP–2 (NTF-TSP–2) um die Durchführbarkeit und Effizienz einer systemischen Tumortherapie mit TSP–2 zu evaluieren und den Wirkmechanismus von TSP–2 zu analysieren. Wir verwendeten ein etabliertes Xenotransplantationsmodell, bei dem MDA-MB–435 Brustkrebszellen orthotop in Nacktmäuse injiziert wurden. Eine Woche nach Inokkulation erfolgte die tägliche intraperitoneale Injektion von NTF-TSP–2. Dies führte nach 16 Behandlungstagen bei Applikation von 2.5, 5.0 und 7.5mg TSP–2-Fragment pro kg KG zu einer signifikanten Wachstumshemmung von 54%, 63% bzw. 82% im Vergleich zur Kontrollbehandlung mit PBS. Durch tägliche systemische Gabe von 5.0mg des TSP–2-Fragmentes pro kg KG wurde zudem die Lymphknoten- und Lungenmetastasierung im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant gehemmt. Die immunhistochemische Gefäßanalyse ergab, dass die Dichte und die Größe der Gefäße in TSP–2-behandelten Tumoren signifikant vermindert waren. Mittels Durchflusszytometrie konnten wir zeigen, dass die Apoptoseinduktion von humanen dermalen mikrovaskulären Endothelzellen (HDMEC) durch NTF-TSP–2 über den CD36 Rezeptor vermittelt wird. Die Behandlung von HDMEC mit NTF-TSP–2 führte in vitro im sogenannten „Tube Formation Assay“ zu einer signifikanten CD36-Rezeptor-abhängigen Hemmung der Ausbildung von "Endothelzellröhren". Zusammenfassend belegen unsere Daten, dass eine systemische Therapie mit NTF-TSP–2 über die CD36 vermittelte Apoptoseinduktion von Endothelzellen effektiv die Progression von Mammakarzinomen hemmt.